降鈣素基因相關肽通過NOS-NO通路抑制缺氧誘導的大鼠心肌細胞凋亡.pdf

1、背景：降鈣素基因相關肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)是降鈣素肽家族的一種神經肽，對缺血缺氧性心血管系統(tǒng)起保護作用，然而其機制尚未明確。
　　目的：研究CGRP是否通過調節(jié)一氧化氮（nitric oxide，NO）抑制缺氧心肌細胞的凋亡。
　　方法：選用大鼠 H9c2心肌細胞建立缺血缺氧損傷模型，給予CGRP和/或一氧化氮合酶（ nitric oxide synthase， NOS

2、)抑制劑（Nω-Nitro-L-arginine methylester hydrochloride，L-NAME）預處理細胞，CCK-8法測定細胞存活率，Western-Blot法測定NOS和凋亡相關蛋白表達水平， NO試劑盒測定 NO釋放量，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ enzyme-linked immunoabsorbent assay， ELISA)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白介素-

3、6(interleukin-6，IL-6)活性。
　　結果：缺氧使心肌細胞存活率降低，誘導性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）表達明顯增加，內皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）和磷酸化內皮型一氧化氮合酶（phosphorylation endothelial nitric oxide synthase，p-eNOS）

4、表達降低，NO釋放減少，p53、caspase-3和細胞色素C(cytochrome C)表達升高；CGRP預處理后，心肌細胞存活率升高，iNOS表達減少， eNOS和p-eNOS表達增加，NO的釋放進一步降低，凋亡相關蛋白活性下降；L-NAME處理后，iNOS和p53表達降低；L-NAME與CGRP共處理后，與CGRP單獨處理相比較，NOS表達降低，p53、caspase-3和cyto C表達升高；同時CGRP可以顯著降低缺氧誘導的T