
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文檔簡介
1、目的:目前,缺氧對右心室心肌細胞凋亡的作用尚不明確,右心室心肌肥大與心肌細胞凋亡的關(guān)系以及右心室心肌細胞凋亡的發(fā)生發(fā)展和機制也不清楚。故通過建立慢性缺氧心肌肥大大鼠模型,研究抗凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bad在右心室心肌細胞中表達的變化,探討慢性缺氧致大鼠心肌細胞凋亡的發(fā)生規(guī)律及其機制。 方法:1.建立慢性缺氧大鼠模型:大鼠置于正常氣壓下行慢性持續(xù)缺氧(氧濃度控制在9.5%~10.5%)。 2.實驗分組和處理:采用析
2、因設(shè)計方法,將大鼠隨機分為慢性缺氧組和正常對照組,并于實驗的第14天,第21天和第28天分批將各組大鼠處死。 3.檢測RV/(LV+S),RV/BW比值,用Hoechst33258雙染色法進行形態(tài)學(xué)觀察,用原位末端標記(TUNEL)法進行心肌細胞凋亡形態(tài)及計量分析,用RT-PCR檢測β-MHC,bcl-2,bad等mRNA的表達水平,用WesternBlotting檢測β-MHC,bcl-2,bad等蛋白的表達水平。 結(jié)
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