X射線(xiàn)心臟局部照射致心肌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制.pdf

1、目的：
　　利用X射線(xiàn)照射大鼠心臟，構(gòu)建心臟輻射損傷動(dòng)物模型，研究放射性心臟損傷（radiation-induced heart disease,RIHD）早期心肌細(xì)胞凋亡可能的分子機(jī)制。
　　方法：
　　48只健康雄性Sprague-Dawley大鼠，隨機(jī)分為假照射組（sham）、照射組（RIHD）。假照射組8只，不接受X射線(xiàn)照射，照射組大鼠心臟接受X射線(xiàn)20Gy單次劑量照射，然后分為12h、24 h、2d、4d、1

2、 w、2w等6個(gè)亞組，分別在照射后（12 h、24 h、2d、4d、1w、2w）取心臟標(biāo)本，分離大鼠左心室心肌，應(yīng)用 TUNNEL法檢測(cè)大鼠心肌細(xì)胞凋亡百分率；采用real-time PCR和western blotting實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)1w組、2w組心肌組織B淋巴細(xì)胞瘤-2相關(guān)X蛋白（BCL-2 associated X protein, Bax）的mRNA和蛋白、細(xì)胞色素C（Cytochrome C, Cyt-C）及心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體Cy

3、t-C的表達(dá)水平變化以及12h組、24h組、2d組、4d組、1w組心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體Bax、BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白截?cái)囿w（Truncated-BH3 interacting domain death agonist,t-Bid）的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況：照射前與照射后一周相比，模型大鼠出現(xiàn)活動(dòng)減少、行動(dòng)緩慢現(xiàn)象，且體重顯著降低（P<0.05）。
　　2.心肌細(xì)胞凋亡情況:與假照射組相比，心肌細(xì)胞在X射線(xiàn)

4、照射后12 h至2 w內(nèi)出現(xiàn)顯著凋亡（P<0.05），且在24h達(dá)到高峰。
　　3. real-time PCR結(jié)果：心肌組織在X射線(xiàn)照射后1w和2w，Bax的mRNA表達(dá)顯著增加（P<0.05）;與照射后2w組相比，1w組表達(dá)更加明顯。
　　4. western blotting結(jié)果：與假照射組相比，○1X射線(xiàn)照射后1w組、2w組心肌組織Bax、Cyt-C表達(dá)增加（P<0.05），而心肌線(xiàn)粒體Cyt-C表達(dá)明顯下降（P<0

5、.05）；○2線(xiàn)粒體Bax在X射線(xiàn)照射后12 h、24 h、2d、4d表達(dá)增加（P<0.05）；○3心肌細(xì)胞線(xiàn)粒體t-Bid在24 h、2d、4d表達(dá)顯著增加（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1. X射線(xiàn)心臟局部照射引起放射性心臟損傷早期出現(xiàn)心肌細(xì)胞凋亡。
　　2.放射性心臟損傷早期心肌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制是線(xiàn)粒體介導(dǎo)促凋亡蛋白Ba x激活且發(fā)生轉(zhuǎn)位，與線(xiàn)粒體膜融合致Cyt-C釋放，啟動(dòng)細(xì)胞凋亡程序。
　　3.