Tbx18處理的心肌細(xì)胞來(lái)源exosomes對(duì)大鼠心臟阻滯心肌細(xì)胞的生物起搏作用及機(jī)制.pdf

1、背景:
　　心臟起搏治療是緩慢性心律失常的治療手段，生物起搏是目前的研究熱點(diǎn)。研究已證實(shí)腺病毒導(dǎo)入并再表達(dá)胚胎轉(zhuǎn)錄因子Tbox18(Tbx18)能使心室肌細(xì)胞重編程為竇房結(jié)樣細(xì)胞，產(chǎn)生生物起搏活動(dòng)，但腺病毒載體存在局限性。Exosomes是由細(xì)胞分泌的一種生物活性微粒，能選擇性裝載蛋白質(zhì)或各類信使RNA等遺傳物質(zhì)，在細(xì)胞-細(xì)胞間發(fā)揮信息傳遞作用。作為一類相容性好，安全無(wú)毒的生物膜泡，exosomes已被廣泛用作腫瘤靶向藥物治療的載

2、體，但在心臟重編程領(lǐng)域的應(yīng)用很少。本研究擬應(yīng)用exosomes作為新的載體，評(píng)估其介導(dǎo)Tbx18對(duì)心肌細(xì)胞重編程的作用，并探討相關(guān)的機(jī)制，旨在探索高效安全的載體來(lái)介導(dǎo)Tbx18對(duì)心肌細(xì)胞的重編程。
　　方法和結(jié)果:
　　分離培養(yǎng)新生大鼠心室肌細(xì)胞(NRVMs)，感染攜帶Tbx18全長(zhǎng)cDNA，并帶綠色熒光蛋白標(biāo)記的腺病毒(Ad-Tbx18)，對(duì)照組感染空載質(zhì)粒，并帶綠色熒光蛋白標(biāo)記的腺病毒(Ad-GFP)。3天后分別收集兩組

3、NRVMs分泌的exosomes，利用Nanosight納米顆粒分析儀對(duì)Tbx18過(guò)表達(dá)NRVMs來(lái)源的exosomes（Tbx18-Exos）和空載病毒感染的NRVMs來(lái)源的exosomes(GFP-Exos)進(jìn)行定量分析。兩組分別取200ul exosomes(10×1010/ml)開胸直接注射到大鼠心尖部。72小時(shí)后通過(guò)尾靜脈注射氯化乙酰膽堿(Ach-cl)建立大鼠心臟阻滯模型，與GFP-Exos注射組相比，Tbx18-Exos注