烏頭堿對心肌細(xì)胞毒作用機制的研究.pdf

1、目的：研究鳥頭堿對心肌細(xì)胞毒作用機制 方法：本實驗采用均勻設(shè)計和MTT方法研究烏頭堿不同濃度和不同時間點對心肌細(xì)胞的影響：用H.E染色法、電子顯微鏡觀察烏頭堿最大毒性劑量及臨界作用時間點對心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)的損傷：用細(xì)胞酶學(xué)方法、流式細(xì)胞儀、比濁法觀察烏頭堿對心肌細(xì)胞膜通透性、穩(wěn)定性、細(xì)胞內(nèi)環(huán)境、細(xì)胞能量代謝和細(xì)胞周期的影響；從而揭示烏頭堿對心肌細(xì)胞毒性損傷的機制。 結(jié)果：烏頭堿對心肌細(xì)胞毒最大毒性劑量是3％，其臨界作用

2、時間點為30s、1m、30m。烏頭堿作用細(xì)胞后，細(xì)胞連接減少，細(xì)胞間空隙增大，細(xì)胞膜不完整、膜凸起消失；線粒體腫脹溶解，溶酶體腫脹溶解，肌絲斷裂溶解，胞漿出現(xiàn)大量的空泡；核紅染，細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮、消失；烏頭堿作用的時間越長，其損傷越嚴(yán)重。細(xì)胞介質(zhì)中LDH活力增高和MDA含量增高，ACP活力增高；Na<'+>-K<'+>ATP的活力、[K<'+>]和[Mg<'2+>]降低，[Na<'+>]和[ca<'2+>]濃度升高：SDH活力降低，糖原

3、的含量降低； cAMP／cGMP值升高；細(xì)胞G<,2>+M、S的比值降低。 結(jié)論：烏頭堿對心肌細(xì)胞的細(xì)胞核染色質(zhì)、線粒體、溶酶體、肌絲、細(xì)胞膜及細(xì)胞連接都有直接的損害：烏頭堿導(dǎo)致心肌細(xì)胞生物膜功能的損傷、能量代謝障礙、核酸的損傷、細(xì)胞增殖抑制；烏頭堿對心肌細(xì)胞毒作用機制可能為：烏頭堿抑制心肌細(xì)胞Na+·K+ATP活性，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Na<'+>濃度升高，K<'+>濃度降低，引起細(xì)胞的興奮性升高和細(xì)胞內(nèi)Ca<'2+>超載，導(dǎo)致細(xì)胞形