降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：本課題探討降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響，為闡明神經(jīng)因素與平滑肌細(xì)胞增生調(diào)控之間的關(guān)系提供理論依據(jù)。 　　方法：取五個(gè)月胎齡水囊引產(chǎn)人胚胎的主動(dòng)脈，體外原代培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞，用α-SM-actin免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定細(xì)胞純度。實(shí)驗(yàn)分為A：聯(lián)胺誘導(dǎo)組；B：聯(lián)胺+CGRP組；C：CGRP組；D：正常對(duì)照組。CGRP和聯(lián)胺的作用濃度分別為2×10-Tmol/L和5×10-6mol/L。用細(xì)胞計(jì)數(shù)法、MTT法檢

2、測(cè)細(xì)胞增殖，RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白D1、E和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(TIMP-2)mRNA的表達(dá)，流式細(xì)胞儀法檢測(cè)細(xì)胞周期的變化。 　　結(jié)論：1、人胚胎血管平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)通過α-SM-actin免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定，純度可達(dá)98％以上。細(xì)胞生長(zhǎng)的第3-5天是細(xì)胞生長(zhǎng)的對(duì)數(shù)期。2、聯(lián)胺作為巰基氧化劑可作為血管平滑肌細(xì)胞增殖的誘導(dǎo)劑。3、CGRP對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的增殖有下調(diào)作用，特別對(duì)聯(lián)胺誘導(dǎo)增生的平滑肌細(xì)胞作用更明顯，提示