TFPI基因轉(zhuǎn)染對(duì)前列腺平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的： 1．研究前列腺平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)方法，為前列腺平滑肌細(xì)胞體外研究提供實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停?2．觀察TFPI基因轉(zhuǎn)染對(duì)體外培養(yǎng)的人增生前列腺平滑肌細(xì)胞增殖的影響； 3．初步探討TFPI基因影響體外培養(yǎng)的人增生前列腺平滑肌細(xì)胞增殖的機(jī)制。 方法：取前列腺增生患者手術(shù)切除的前列腺組織，采用酶消化法分離前列腺平滑肌細(xì)胞；采用免疫組化方法進(jìn)行細(xì)胞鑒定；后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用第五代細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組將pIRES-TFPI基因轉(zhuǎn)染入體外

2、培養(yǎng)的前列腺平滑肌細(xì)胞，對(duì)照組用空白質(zhì)粒pIRES進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法和四氮唑藍(lán)MTT法觀察對(duì)細(xì)胞增殖的影響；采用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)TFPI基因的表達(dá)情況。 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)采用增生前列腺分離的前列腺細(xì)胞呈典型的“峰與谷”樣生長(zhǎng)，通過SMA免疫組化染色和MASSON染色鑒定，證實(shí)為分離的細(xì)胞絕大多數(shù)為平滑肌細(xì)胞。TFPI基因轉(zhuǎn)染后，前列腺平滑肌細(xì)胞內(nèi)的TFPImRNA水平明顯提高，是未轉(zhuǎn)染組的7倍，對(duì)照質(zhì)粒組的3.5倍，