降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)性疲勞的影響研究.pdf

1、目的：探討CGRP對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)性疲勞的影響。
　　 方法：成年健康雄性SD大鼠，依據(jù)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)至力竭的時(shí)間剔除運(yùn)動(dòng)能力太差和運(yùn)動(dòng)能力太強(qiáng)的大鼠依據(jù)不同的預(yù)處理措施隨機(jī)分成五組：空白對(duì)照組、PBS預(yù)處理組、CGRP預(yù)處理組(降鈣素基因相關(guān)肽，calcitonin gene-related peptide，CGRP)、CAP預(yù)處理組(辣椒素，capsaicin，CAP)、CAP預(yù)處理+CGRP預(yù)處理組，各組動(dòng)物在安靜狀態(tài)時(shí)、運(yùn)動(dòng)80分鐘

2、時(shí)和運(yùn)動(dòng)至力竭后即刻處死。然后用免疫組化和放射免疫方法檢測(cè)上述條件下大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達(dá)變化；用HE染色觀察上述條件下運(yùn)動(dòng)性疲勞大鼠骨骼肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化；用化學(xué)比色的方法檢測(cè)上述條件下骨骼肌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathioneperoxidase，GSH-PX)、過(guò)氧化氫酶(catalase，CAT)及丙二醛(malondialdehyde，MDA

3、)的變化。
　　 結(jié)果：①給予CGRP預(yù)處理后，大鼠運(yùn)動(dòng)至力竭的時(shí)間明顯縮短(P<0.05)，而給予CAP預(yù)處理后大鼠運(yùn)動(dòng)至力竭的時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P<0.05)。②CGRP免疫組織化學(xué)和放射免疫結(jié)果顯示：CGRP的免疫陽(yáng)性產(chǎn)物在肌纖維縱切面上，其形狀為橢圓形或棒狀，主要分布于肌纖維膜的表面。給予CGRP預(yù)處理后，大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達(dá)明顯升高(P<0.05)，而給予CAP預(yù)處理后，大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達(dá)

4、明顯下降(P<0.05)。③HE染色顯示：安靜狀態(tài)下各組骨骼肌的形態(tài)結(jié)構(gòu)未見(jiàn)明顯改變；運(yùn)動(dòng)80min時(shí)與安靜狀態(tài)下相比，除CGRP預(yù)處理組骨骼肌的細(xì)胞核明顯增多、增大外，其余各組均無(wú)明顯改變；力竭運(yùn)動(dòng)后即刻與安靜狀態(tài)下相比除CAP預(yù)處理組無(wú)明顯改變外，其余各組骨骼肌的細(xì)胞核均明顯增多、增大。④化學(xué)比色結(jié)果顯示：給予CGRP預(yù)處理后，大鼠骨骼肌中SOD、GSH-PX和CAT的活性明顯下降(P<0.05)，MDA的含量明顯上升(P<0.05

5、)，而給予CAP預(yù)處理后大鼠骨骼肌中SOD、GSH-PX和CAT的活性明顯上升(P<0.05)，MDA的含量明顯下降(P<0.05)。
　　 小結(jié)：CGRP加劇了運(yùn)動(dòng)性疲勞的產(chǎn)生。
　　 目的：檢測(cè)CGRP對(duì)運(yùn)動(dòng)性疲勞大鼠AChE的影響，探討CGRP對(duì)運(yùn)動(dòng)性疲勞的作用機(jī)制。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理同第一部分。通過(guò)免疫組化和組織化學(xué)的方法檢測(cè)不同干預(yù)措施條件下運(yùn)動(dòng)性疲勞大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達(dá)情

6、況和活性變化，并用酶聯(lián)免疫吸附分析和化學(xué)比色法對(duì)AChE的表達(dá)和活性改變進(jìn)行定量分析。并對(duì)大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的濃度與AChE的表達(dá)和活性進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析。
　　 結(jié)果：①AChE免疫組織化學(xué)、酶聯(lián)免疫吸附分析、組織化學(xué)和化學(xué)比色結(jié)果顯示：給予CGRP預(yù)處理后，大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達(dá)和活性顯著降低(P<0.05)。而給予CAP預(yù)處理后大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達(dá)和活性顯著升高(P<0.05)

7、。②相關(guān)分析顯示大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭CGRP的表達(dá)量與AChE的表達(dá)呈負(fù)性相關(guān)，其中安靜狀態(tài)組r=0.78(p=0.000)，80分鐘組r=0.92(p=0.000)，力竭組r=0.88(p=0.000)；CGRP的表達(dá)量與AChE的活性也呈負(fù)性相關(guān)，其中安靜狀態(tài)組r=0.81(p=0.000)，80分鐘組r=0.92(p=0.000)，力竭組r=0.89(p=0.000)?；貧w分析顯示AChE表達(dá)的下降在安靜狀態(tài)組有61％(r2=0

8、.61)，在80分鐘組有85％(r2=0.85)，在力竭組有78％(r2=0.78)的可能是由CGRP的變化引起。AChE活性的下降在安靜組有66％(r2=0.66)，在80分鐘組有84％(r2=0.84)，在力竭組有79％(r2=0.79)的可能是由CGRP的變化引起。提示CGRP濃度的改變與大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE表達(dá)和活性的下降呈負(fù)相關(guān)。
　　 小結(jié)：CGRP通過(guò)調(diào)節(jié)大鼠腓腸肌神經(jīng)肌肉接頭AChE的表達(dá)和活性促進(jìn)了運(yùn)