反義鯊烯合酶基因表達(dá)對(duì)青蒿素生物合成的影響.pdf

1、青蒿素是從中藥青蒿中提取的新型抗瘧藥物，然而，青蒿素在青蒿中的含量非常低。近年來，隨著青蒿素生物合成途徑相關(guān)酶基因的克隆，基因工程成為提高青蒿素含量的有效途徑之一。在對(duì)青蒿進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化過程中，高效穩(wěn)定的叢生芽誘導(dǎo)體系是青蒿轉(zhuǎn)化成功的關(guān)鍵。然而，隨著繼代次數(shù)的增多，青蒿叢生芽誘導(dǎo)能力存在退化現(xiàn)象。本文首先研究了濾紙對(duì)青蒿叢生芽誘導(dǎo)的影響和在遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用，進(jìn)而研究了反義鯊烯合酶基因表達(dá)對(duì)青蒿素生物合成的影響。主要結(jié)果如下：
　　

2、 研究了在叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上加鋪濾紙對(duì)青蒿叢生芽誘導(dǎo)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加鋪濾紙后青蒿叢生芽誘導(dǎo)率顯著提高，叢生芽誘導(dǎo)率能夠達(dá)到97％左右。在此高效叢生芽誘導(dǎo)體系的基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步探討了濾紙?jiān)谇噍镞z傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用。結(jié)果表明，在篩選培養(yǎng)基上加鋪一層濾紙，青蒿的抗性叢生芽誘導(dǎo)率能夠達(dá)到59.7％，其中在12.5％的抗性叢生芽中能夠得到抗性生根植株，生根植株P(guān)CR檢測(cè)均為陽性，在部分PCR檢測(cè)陽性的植株中檢測(cè)到了GUS的穩(wěn)定表達(dá)。