阿霉素和miR-21抑制劑聯(lián)用對(duì)膠質(zhì)瘤協(xié)同抑制作用機(jī)制的研究.pdf

1、表觀遺傳學(xué)修飾的DNA甲基化在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。啟動(dòng)子區(qū)抑癌基因的高甲基化與腫瘤的關(guān)系最為密切，它是抑癌基因轉(zhuǎn)錄失活的主要途徑。研究發(fā)現(xiàn)化療藥物阿霉素DOX和微小RNA均可參與腫瘤的甲基化。本文基于甲基化過(guò)程中重要的甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT1為切入點(diǎn)，以膠質(zhì)瘤為模型，首先研究阿霉素對(duì)DNMT1表達(dá)的影響及其抑制腫瘤機(jī)制，同時(shí)從基因水平，分析miR-21對(duì)DNMT1的調(diào)控作用，探索miR-21與甲基化的關(guān)系。進(jìn)一步將阿霉素與miR-

2、21抑制劑聯(lián)用，探討了兩者協(xié)同抑制膠質(zhì)瘤的效果及其機(jī)制。
　　以U87、U87-EGFRvIII和LN229三種膠質(zhì)瘤細(xì)胞為模型，對(duì)上述機(jī)制進(jìn)行研究。結(jié)果表明，三種細(xì)胞系經(jīng)阿霉素獨(dú)立處理后，DNMT1的蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)水平均有明顯的下調(diào)，甲基化相關(guān)編碼基因PTEN和p21的表達(dá)水平則明顯上調(diào)，非編碼基因miR-200a/b/429和miR-181d也出現(xiàn)不同程度的上調(diào)。當(dāng)miR-21抑制劑獨(dú)立處理三個(gè)細(xì)胞系之后，DNMT

3、1的蛋白表達(dá)水平下調(diào)，E-cadherin、RECK、PTEN、VHL及miR-200a/b/429和miR-181d表達(dá)水平上調(diào)。證明了阿霉素和miR-21在DNA甲基化中具有重要作用。聯(lián)合使用阿霉素與miR-21抑制劑，顯著增強(qiáng)了三種細(xì)胞系E-cadherin、RECK、PTEN、VHL、p21及miR-200a/b/429和miR-181d的表達(dá)水平，并使三種細(xì)胞系增值率顯著降低，侵襲和遷移能力下降。
　　本研究證明，阿霉素