糖皮質(zhì)激素與吩噻嗪類藥物的超高壓液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析與藥物代謝研究.pdf

1、當(dāng)前，食品、藥品安全事件頻發(fā)，由此造成的危害以及安全隱患嚴(yán)重危害大眾的身體健康與生命安全，影響社會(huì)經(jīng)濟(jì)秩序。食品安全已經(jīng)成為一個(gè)全球性的問題，如何完善食品安全檢驗(yàn)檢測體系，加強(qiáng)食品安全國際協(xié)作與發(fā)展等問題已成為食品行業(yè)發(fā)展的重中之重。 糖皮質(zhì)激素是由腎上腺皮質(zhì)分泌的一類甾體激素，在臨床上用途十分廣泛。目前人們在喂養(yǎng)牲畜中常加入此藥作為動(dòng)物生長調(diào)節(jié)劑，以達(dá)到促進(jìn)動(dòng)物蛋白質(zhì)合成與代謝，從而增加產(chǎn)肉量的目的，此藥在食品中殘留會(huì)給人體健

2、康帶來危害。吩噻嗪類藥物是一種比較常見的神經(jīng)性藥物，它們主要作用于大腦網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，以減輕焦慮緊張、幻覺妄想和病理性思維等精神癥狀。其在獸醫(yī)臨床上的藥理作用廣泛，飼料中添加此類藥物，可間接起到催肥作用；另外，使用吩噻嗪類藥物可減少動(dòng)物運(yùn)輸過程中的死亡率。因該類藥物脂溶性高，易蓄積于脂肪組織，停藥后數(shù)周乃至半年后，尿中仍可檢出其代謝物，且部分代謝物仍具有藥物活性。殘留的的藥物能引起白細(xì)胞減少和粒細(xì)胞缺乏癥，從而引起人體肝臟、腎臟的病變，還會(huì)引

3、起眼部并發(fā)癥等。目前這些藥物在養(yǎng)殖業(yè)中的使用已經(jīng)引起了美國、歐盟和日本等國家的高度重視。 本論文發(fā)展了超高效液相色譜-電噴霧電離串聯(lián)四級桿質(zhì)譜分別對糖皮質(zhì)激素、吩噻嗪類藥物的檢測方法。借助飛行時(shí)間質(zhì)譜，論文對氯丙嗪、異丙嗪這兩種吩噻嗪類藥物在大鼠的體內(nèi)、體外代謝進(jìn)行了研究。 本論文由四部分組成：1.文獻(xiàn)綜述；2.液質(zhì)聯(lián)用檢測糖皮質(zhì)激素類藥物地塞米松、倍他米松、倍氯米松；3.固相萃取超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜對動(dòng)物源食

4、品中氯丙嗪、異丙嗪及其代謝物氯丙嗪亞砜和異丙嗪亞砜的測定；4氯丙嗪，異丙嗪等藥物的體內(nèi)和體外代謝物的分析及動(dòng)力學(xué)表征。 第一章文獻(xiàn)綜述，主要介紹了食品安全問題，吩噻嗪類藥物的性質(zhì)，用途，毒害和常用的檢測方法以及代謝組學(xué)方面的知識(shí)，并對藥物的體內(nèi)體外代謝物研究的現(xiàn)狀及意義進(jìn)行了分析，并在此基礎(chǔ)上提出了本論文的研究設(shè)想。 第二章建立了豬肉中糖皮質(zhì)激素類藥物地塞米松、倍他米松、倍氯米松同時(shí)測定的超高效液相色譜-電噴霧電離串聯(lián)四

5、級桿質(zhì)譜(UPLC-MS-MS)方法，對樣品前處理方法進(jìn)行改進(jìn)，確定了最佳提取劑。實(shí)驗(yàn)采用多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)正離子模式，超高壓反相C18色譜柱分離，梯度洗脫，對豬肉中的地塞米松、倍他米松、倍氯米松進(jìn)行定性和定量測定。在質(zhì)量濃度1～100μg/L范圍內(nèi)具有良好的線性。方法的回收率在83％～96％之間，定量線(S/N>10)地塞米松、倍他米松和倍氯米松分別為1μg/kg、1μg/kg、2μg/kg。 第三章發(fā)展了一種固相萃取超高效

6、液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜方法對動(dòng)物源食品中氯丙嗪、異丙嗪及其代謝物氯丙嗪亞砜和異丙嗪亞砜進(jìn)行了測定。目前有關(guān)動(dòng)物源性食品中氯丙嗪、異丙嗪及其代謝物的測定方法還較少，大部分研究都局限于法醫(yī)學(xué)方面。隨著我國加入WTO，迫切需要制定一些先進(jìn)、準(zhǔn)確的測定方法。本方法采用乙酸乙酯提取，經(jīng)固相萃取，由UPLC-MS-MS測定，外標(biāo)法定量動(dòng)物源性食品中吩噻嗪類藥物及其代謝物。所建立的方法具有快速、準(zhǔn)確、抗干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn)，其定量限(S/N>10)氯丙

7、嗪、異丙嗪為5μg/kg，氯丙嗪亞砜、異丙嗪亞砜為1μg/kg，滿足動(dòng)物源性食品中吩噻嗪類藥物及其代謝物檢測的國際標(biāo)準(zhǔn)。 第四章對氯丙嗪，異丙嗪代謝的研究及代謝產(chǎn)物進(jìn)行了表征。本部分的研究通過體外試驗(yàn)(invitro)和體內(nèi)試驗(yàn)(invivo)兩種方法。體外試驗(yàn)是提取了大鼠的肝臟，采用肝微粒體(microsome)等體系模擬動(dòng)物體的肝代謝系統(tǒng)，藥物在該體系中進(jìn)行代謝反應(yīng)，通過反應(yīng)結(jié)果對代謝進(jìn)行評估。體內(nèi)試驗(yàn)中將藥物灌喂到大鼠體內(nèi)

8、，通過對大鼠排泄物、血液、肝臟中藥物及其代謝物的測定對藥物及其代謝成分進(jìn)行分析。 本文的創(chuàng)新點(diǎn)在于： (1)對糖皮質(zhì)激素類藥物地塞米松、倍他米松、倍氯米松的測定方法進(jìn)行摸索，建立了超高壓液相色譜串聯(lián)電噴霧質(zhì)譜的檢測方法，操作簡單快速，靈敏度高。 (2)對動(dòng)物源食品中氯丙嗪、異丙嗪及其代謝物氯丙嗪亞砜和異丙嗪亞砜進(jìn)行分析，建立了新的分析方法。對吩噻嗪類藥物氯丙嗪、異丙嗪的體內(nèi)、體外代謝進(jìn)行了研究，找出了新的代謝產(chǎn)物