apelin基因rs2235306位點(diǎn)多態(tài)性與哮喘的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:
　　支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱哮喘，Asthma）是一種氣道慢性炎癥性疾病，其有多種細(xì)胞和細(xì)胞因子共同參與，既受遺傳因素又受環(huán)境因素的影響，具有明顯家族聚集傾向性，屬于多基因遺傳性疾病，是由多因素共同影響和作用的結(jié)果，哮喘具有異質(zhì)性，患者之間存在明顯個(gè)體差異。哮喘的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，至今尚未明確定論。近幾年來(lái)研究表明，炎癥機(jī)制、免疫調(diào)控及遺傳因素在哮喘的發(fā)生過程中起著重要的作用。而apelin作為一種機(jī)體脂肪組織合成并且分泌的一

2、些前炎癥細(xì)胞因子可能在炎癥應(yīng)答和免疫途徑發(fā)揮著重要的作用。1998年，通過反向藥理學(xué)方法apelin首次從牛胃的分泌物中提取出來(lái)并進(jìn)一步純化，apelin是血管緊張素受體AT1相關(guān)受體蛋白(putative receptor protein related to the angiotensin receptor AT1,APJ)的天然配體，后來(lái)研究發(fā)現(xiàn)apelin具有多種生物學(xué)功能。apelin原前體肽的特異性結(jié)合apelin受體的區(qū)域

3、是C末端，各物種間完全保守的氨基酸共有23個(gè)，包括從Trp55到Phe77，且富含精氨酸，這提示C末端可能具有重要的特異性功能。apelin影響著多種呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展，有研究表明apelin表達(dá)水平最高的是在肺組織中，在調(diào)節(jié)肺部血液循環(huán)的微環(huán)境、及調(diào)節(jié)免疫、氧化損傷、內(nèi)皮增殖中發(fā)揮著作用，而且還具有抗病毒及抗炎等作用。目前為止，但apelin基因與哮喘發(fā)病的關(guān)系研究甚少，而其在分子生物學(xué)水平的研究迄今為止未見報(bào)道。本研究通過病例

4、對(duì)照，并應(yīng)用四引物擴(kuò)增受阻突變體系（Tetra-primer ARMS）聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase Chain Reaction,PCR），簡(jiǎn)稱T-ARMS-PCR，來(lái)研究apelin基因rs2235306多態(tài)性與哮喘的關(guān)系以及對(duì)哮喘病情嚴(yán)重程度的影響。本研究是我們課題組的一個(gè)后續(xù)研究，目的在于探討apelin基因多態(tài)性與哮喘及哮喘嚴(yán)重程度的關(guān)系，以論證apelin是哮喘的重要發(fā)病機(jī)制假說，為哮喘病人的預(yù)防和有效治療提供理論根據(jù)

5、，進(jìn)而從早期就可以對(duì)哮喘進(jìn)行干預(yù)，以達(dá)到減少哮喘發(fā)作并指導(dǎo)相應(yīng)的基因治療的目的。
　　目的:
　　探討apelin基因rs2235306位點(diǎn)多態(tài)性與哮喘的相關(guān)性。
　　方法:
　　以外周血全血DNA為模板，應(yīng)用四引物擴(kuò)增受阻突變體系T-ARMS-PCR方法對(duì)158例哮喘患者（AS）和79例健康個(gè)體（NC）apelin基因rs2235306位點(diǎn)基因型進(jìn)行分析，同時(shí)進(jìn)行肺功能檢查(FEV1、FVC、FEV1/FVC)

6、。
　　結(jié)果:
　　AS組和NC組apelin基因rs2235306位點(diǎn)等位基因T和C頻率分布具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.906，P=0.009，OR=1.688，95％CI=1.140-2.497)，哮喘組（AS組）C等位基因頻率顯著高于健康對(duì)照組（NC組）；AS組和NC組基因型的分布具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.243，P=0.000，OR=3.894，95%CI=1.861-8.149)，其中CC基因型患哮喘的風(fēng)險(xiǎn)較高，為

7、TT+TC基因型的3.894倍。AS輕度組和AS中重度組基因型中，apelin基因rs2235306位點(diǎn)基因型CC和基因型TT+TC頻率及等位基因T和C頻率比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　?。?）apelin基因rs2235306位點(diǎn)多態(tài)性和哮喘的發(fā)病具有一定的相關(guān)性；
　?。?）apelin基因rs2235306位點(diǎn)C等位基因可能是哮喘的遺傳易感基因，CC基因型攜帶者哮喘的患病風(fēng)險(xiǎn)可能增加；
　?。?）ap

8、elin基因rs2235306位點(diǎn)多態(tài)性與哮喘的嚴(yán)重程度無(wú)明顯相關(guān)性。
　　意義:
　　本課題具有創(chuàng)新性。本課題是國(guó)內(nèi)外首次尋找apelin基因多態(tài)性在哮喘病人中的分布特點(diǎn)，以確定apelin基因rs2235306位點(diǎn)SNPs與哮喘嚴(yán)重程度的關(guān)系，驗(yàn)證apelin是哮喘的重要發(fā)病機(jī)制假說。在實(shí)驗(yàn)技術(shù)上具有新穎性，采用應(yīng)用T-ARMS-PCR技術(shù)觀察其SNPs與哮喘病嚴(yán)重程度關(guān)系，只需要一步PCR反應(yīng)及瓊脂糖電泳技術(shù)，就能尋找