大蒜辣素穩(wěn)定性及制備工藝研究.pdf

1、目的：在前期生物合成法及膜分離技術(shù)制備大蒜辣素的基礎(chǔ)上，確定5mg/ml大蒜辣素注射液的制備工藝，并以穩(wěn)定工藝實驗室小試生產(chǎn)大蒜辣素注射液；考察注射液的穩(wěn)定性；確定大蒜辣素注射液中雜質(zhì)含量；建立大蒜辣素注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）及起草說明。改進大蒜辣素生產(chǎn)工藝提高大蒜辣素穩(wěn)定性。考察大蒜辣素在35℃時水、細(xì)胞培養(yǎng)液、血清和全血中的穩(wěn)定性，為大蒜辣素體外實驗及藥代動力學(xué)實驗提供前期研究基礎(chǔ)。建立分子蒸餾技術(shù)純化及濃縮大蒜辣素的方法。

2、　　 方法：1.按建立的工藝操作規(guī)程進行十余批大蒜辣素注射液的制備，考察大蒜辣素注射液不同溫度下的穩(wěn)定性，按藥典規(guī)定進行大蒜辣素注射液長期穩(wěn)定性考察，根據(jù)測定的數(shù)據(jù)擬合動力學(xué)曲線計算半衰期（t1/2）及達到標(biāo)示量下限4.5mg/ml的時間（T90%）。2.通過主成分自身對照法來確定大蒜辣素注射液中的雜質(zhì)含量，依照藥典的各項規(guī)定建立大蒜辣素注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）及起草說明。3.通過添加抗氧化劑、抗凝劑、低溫反應(yīng)和惰性氣體保護等措施改進大

3、蒜辣素制備工藝，提高大蒜辣素穩(wěn)定性。4.考察大蒜辣素溶液在35℃的水、細(xì)胞培養(yǎng)液、血清及全血中的穩(wěn)定性，計算半衰期。5.生物合成大蒜辣素溶液后直接用有機溶劑提取后通過分子蒸餾進行濃縮和純化，獲得大蒜辣素溶液，對產(chǎn)物進行鑒定。
　　 結(jié)果：1.經(jīng)多批次5mg/ml大蒜辣素注射液的合成 完善了制備工藝，大蒜辣素注射液在0~4℃儲存4.1個月是穩(wěn)定的。2.主成分自身對照法結(jié)果顯示大蒜辣素注射液中雜質(zhì)含量為6.0%~7.0%，根據(jù)多批次

4、產(chǎn)品的結(jié)果建立了大蒜辣素注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）及起草說明。3.加入抗氧化劑和抗凝劑，均提高大蒜辣素溶液穩(wěn)定性，其中大蒜辣素/乙醇（40%）溶液穩(wěn)定性達到8.3個月。4.大蒜辣素溶液35℃時在細(xì)胞培養(yǎng)液中的半衰期為52.90小時、血清的半衰期為42.78小時及全血的半衰期為14.38小時。 5.分子蒸餾技術(shù)純化及濃縮大蒜辣素溶液的條件為進料速度10ml/min，刮板速度40r/min，冷卻溫度3.0℃，真空度10-1torr；大蒜辣素的濃