2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、豬卵母細胞凍存技術處于不斷優(yōu)化的狀態(tài),由于其結(jié)構(gòu)的獨特性,凍融過程中滲透壓等的變化均會對卵母細胞膜及細胞器造成一定程度的損傷,為了檢測CLC及LDL對凍融后豬卵母細胞線粒體膜電位及ZP泛素化水平的影響,本研究應用玻璃化冷凍及緩慢冷凍兩種方法,分別比較添加兩種不同濃度的冷凍載體LDL及CLC后卵母細胞的線粒體膜電位差異,并分析玻璃化冷凍后MⅡ期卵母細胞的透明帶泛素化程度。試驗主要采用SDS-PAGE以及Western blot方法對不同處

2、理組的豬卵母細胞透明帶蛋白樣品進行分析,并用線粒體膜電位特異探針JC-1標記各處理組線粒體膜電位,采用熒光顯微鏡觀察紅、綠熒光強度和分布情況,為尋找更好的卵母細胞凍融方法并使之更好地應用于生產(chǎn)實踐提供理論支持。試驗得到以下結(jié)果:
  1.玻璃化冷凍和緩慢冷凍方法凍融GV期卵母細胞后,LDL及CLC處理組存活率分別74.84%,55.26%以及69.86%,44.53%,玻璃化冷凍豬MⅡ期卵母細胞解凍后添加不同濃度CLC處理組的細胞

3、存活率均高于LDL冷凍處理組;添加10% CLC凍融處理組的細胞存活率顯著高于其他處理組,與新鮮組無顯著差異(P>0.05);
  2.冷凍保護劑中添加不同濃度的CLC和LDL(1%,10%,20%)處理組在冷凍解凍后培養(yǎng),MⅡ期卵母細胞透明帶蛋白免疫印跡結(jié)果分別顯示在63 kDa,82 kDa,110 kDa處以及61 kDa,80 kDa,106 kDa處發(fā)生不同程度的泛素化標記,且泛素化條帶灰度值差異顯著,表明豬卵母細胞體外

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