不同處理對(duì)豬卵母細(xì)胞透明帶泛素化水平的影響.pdf

1、本試驗(yàn)?zāi)康氖翘剿黧w外成熟培養(yǎng)過程中豬卵母細(xì)胞 GV期和 MⅡ期透明帶蛋白泛素化水平以及PSMD4對(duì)透明帶蛋白泛素化的影響，探討豬卵透明帶蛋白泛素化在精卵結(jié)合中的作用，為降低多精入卵提高豬精子生育力提供理論基礎(chǔ)和參考依據(jù)。從而，通過了解豬卵母細(xì)胞的生物學(xué)特性，優(yōu)化卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)、體外受精技術(shù)等輔助生殖技術(shù)，避免卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)對(duì)透明帶泛素化水平的影響導(dǎo)致的一些安全問題。本試驗(yàn)主要采用SDS-PAGE、Western blot等試驗(yàn)方

2、法對(duì)不同處理的豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白樣品進(jìn)行分析，試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　1、GV期與MⅡ期豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白（ZP）免疫印跡結(jié)果顯示約65 kDa、85 kDa和120 kDa處發(fā)生不同程度的泛素化標(biāo)記，且泛素化條帶的灰度值都差異顯著，表明豬卵母細(xì)胞體外成熟過程中透明帶蛋白均發(fā)生不同程度的泛素化。
　　2、成熟培養(yǎng)液中添加PSMD4抗體對(duì)豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白影響的免疫印跡結(jié)果顯示在120 kDa處，未添加PSMD4抗體組標(biāo)記出

3、泛素化蛋白ZP1，而添加PSMD4抗體組未標(biāo)記出泛素化蛋白 ZP1，兩組65 kDa、85 kDa處均標(biāo)記出的不同程度的泛素化。對(duì)條帶進(jìn)行灰度值分析發(fā)現(xiàn)，兩組的條帶灰度值差異顯著。說明ZP1蛋白在PSMD4抗體的參與下未發(fā)生泛素化，而ZP2、ZP3泛素化水平下降。
　　3、不同培養(yǎng)時(shí)間的豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白(ZP)免疫印跡結(jié)果顯示約在65 kDa、85 kDa和120 kDa處均標(biāo)記出泛素化蛋白，且52 h之后透明帶泛素化程度均有