高原鼢鼠藥用價值及分子機(jī)制研究.pdf

1、高原鼢鼠(Myospalaxbaileyi)屬倉鼠科(Cricetidae.)鼢鼠亞科，鼢鼠屬(Myospalax)，是棲息于青藏高原，危害草場和農(nóng)田的地下嚙齒動物。塞隆骨為高原鼢鼠的干燥全骨架，是中藥第一類新藥材，研究發(fā)現(xiàn)其藥理作用與虎骨有類似之處，主治風(fēng)寒濕痹引起的肢體關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、肌膚麻木、腰膝酸軟。　　本論文以高原鼢鼠為研究對象，提取塞隆骨的脂提物、醇提物、水提物和骨膠，制備塞隆骨水煎劑，探討塞隆骨的藥用價值；并利用生物酶水

2、解高原鼢鼠肌肉，以期對高原鼢鼠進(jìn)行綜合開發(fā)利用，提高其經(jīng)濟(jì)價值和社會意義?！　榱颂接懨附馕锷砘钚怨δ埽ㄟ^MTT法和中性紅比色法測定其對正常小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能、NK細(xì)胞殺傷毒性，鼠抗體生成脾細(xì)胞數(shù)(IgM-PFC)，對酶解物進(jìn)行了免疫活性實(shí)驗(yàn)?！　檫M(jìn)一步從分子水平上探討塞隆骨促成骨樣細(xì)胞增殖、分化、成熟的機(jī)理，實(shí)驗(yàn)設(shè)計了對成骨樣細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳和流式細(xì)胞儀對成骨樣細(xì)

3、胞的凋亡進(jìn)行了研究?！?為了探討塞隆骨不同提取物抗炎機(jī)制，采用能夠同時作用于炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的藥物篩選模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)獲得能穩(wěn)定表達(dá)即融合蛋白的HepG2細(xì)胞系，以脂多糖(LPS)刺激誘發(fā)炎性因子生成，定性和定量檢測不同提取物作用于該細(xì)胞系后熒光強(qiáng)度的變化，探討塞隆骨不同提取物作用后對NF-kb活化的特點(diǎn)；用SDS-聚丙烯酰胺凝膠將腫瘤細(xì)胞分泌到培養(yǎng)上清中的明膠酶和他們的活性形式按分子量大小分開，經(jīng)TritonX-10