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1、目的:研究白藜蘆醇(Resveratrol, Res)作用前后γδT細(xì)胞對(duì)結(jié)腸癌SW-1116細(xì)胞殺傷活性的變化并初步探討其機(jī)制。
方法:異戊烯焦磷酸法體外擴(kuò)增人外周血γδT細(xì)胞;不同濃度的白藜蘆醇作用于γδT細(xì)胞和結(jié)腸癌SW-1116細(xì)胞,四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)γδT細(xì)胞及結(jié)腸癌SW-1116細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)白藜蘆醇作用前后γδT細(xì)胞穿孔素、顆粒酶B、CD107a的表達(dá);乳酸脫氫
2、酶(LDH)釋放法檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)γδT細(xì)胞殺傷結(jié)腸癌SW-1116細(xì)胞的影響;Western-blot檢測(cè)白藜蘆醇作用前后γδT細(xì)胞細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)蛋白的活性。
結(jié)果:濃度在0.39~3.125μmol/L的白藜蘆醇作用48h后,γδT細(xì)胞的增殖率較對(duì)照組顯著提高(P<0.05);濃度12.5~100μmol/L的白藜蘆醇對(duì)結(jié)腸癌SW-1116細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;白藜蘆醇作用后,γδT細(xì)胞
3、的穿孔素、顆粒酶B、CD107a的表達(dá)率顯著高于對(duì)照組(P<0.05);濃度0.2~12.5μmol/L的白藜蘆醇作用48h后,對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞SW-1116的殺傷活性顯著高于對(duì)照組(P<0.01);濃度0.1~10μmol/L白藜蘆醇作用后,γδT細(xì)胞的p-ERK1/2表達(dá)率較對(duì)照組顯著增加(P<0.05)。
結(jié)論:適當(dāng)濃度的白藜蘆醇能夠有效促進(jìn)γδT細(xì)胞的增殖,并增強(qiáng)其對(duì)結(jié)腸癌SW-1116細(xì)胞的殺傷能力,其機(jī)制可能與白藜
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