骨巨細(xì)胞瘤中Bax蛋白和Fas抗原的表達(dá)及意義.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文骨巨細(xì)胞瘤中Bax蛋白和Fas抗原的表達(dá)及意義姓名：肖萬軍申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：范文宇2000.4.1實(shí)驗(yàn)材料(一)標(biāo)本:中國醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院病理室1995年10月至2000年4月的骨巨細(xì)胞瘤石蠟標(biāo)本56例。經(jīng)三位病理專家復(fù)查HE染色切片再次確認(rèn)，確診并取得一致結(jié)果的共42例，其中按照J(rèn)afe分級I級18例，I級15例，m級9例。(二)診斷標(biāo)準(zhǔn):病人有患處疼痛史，X線表現(xiàn)為侵及骨脂的溶骨性病

2、灶而無反應(yīng)性新骨形成，病變部骨皮質(zhì)膨脹變薄，呈肥皂泡樣改變。鏡下可見多核巨細(xì)胞均勻散布于大量圓形，橢圓形或肥碩的短梭形單核基質(zhì)細(xì)胞中，兩者的胞核相象。腫瘤富有血管，常伴有出血。多核巨細(xì)胞的核數(shù)從數(shù)個到數(shù)十個不等。(三)Jafe分級標(biāo)準(zhǔn):多核巨細(xì)胞數(shù)量甚多，基質(zhì)細(xì)胞分化良好者屬于I級多核巨細(xì)胞數(shù)量很少，基質(zhì)細(xì)胞分化較差，有絲分裂像多者屬于1級介于兩者之間者為五級。(四)試劑:鼠抗人Bax單克隆抗體(即用型)，鼠抗人Fas單克隆抗體(即用型

3、)和二步法免疫組化試劑以及DAB均購自美國抗體診斷有限公司。實(shí)驗(yàn)方法(一)二步法免疫組化染色:5p=石蠟切片常規(guī)脫蠟、水化，再經(jīng)0.01MPH=6.0的構(gòu)椒酸緩沖液微波修復(fù)20分鐘并室溫冷卻20分鐘，再用3%過氧化氫溶液固定5分鐘，依次加人A液(一抗鼠抗人Bax單克隆抗體，室溫60分鐘).B液(抗小鼠抗體同辣根過氧化物醉的化合物，室溫30分鐘)。個步間均以PBS(PH值=7.4)緩沖液浸洗3次，每次2分鐘。DAB顯色，蘇木素復(fù)染，常規(guī)脫