破骨細胞分化因子及其受體在骨巨細胞瘤中的表達及意義.pdf

1、該實驗采用RT-PCR、免疫組化、細胞培養(yǎng)方法,分別從mRNA及蛋白水平研究ODF、OPG、RANK在GCT中的表達,探討它們與GCT中較豐富的破骨細胞樣多核巨細胞形成的關系,并進一步了解ODF、OPG由哪種細胞表達及其表達的意義,以及與腫瘤的分級和預后的關系.材料與方法:1.材料(1)取GCT新鮮標本5例,GCT傳代細胞2株—GT-55、GT-56(為液氮凍存細胞株,凍存前分別為原代培養(yǎng)至第10代、第2代),骨肉瘤細胞2株-MG63、

2、U2OS.(2)收集有完整病例記錄的骨巨細胞瘤病例44例,找出每例有代表性的玻片按Jaffe分級法重新分級,并找出相應蠟塊切片.2.方法(1)RT-PCR檢測GCT組織、細胞株及對照組骨肉瘤細胞株中ODF、OPG、RANKmRNA表達.(2)免疫組化檢測GCT組織中ODF、OPG蛋白表達.(3)細胞爬片免疫組化,分別檢測ODF、OPG和Ki67的表達.結論:1.GCT組織中有ODF、OPG、RANK mRNA表達,ODF表達豐富,ODF

3、/OPG比值遠遠高于骨肉瘤,很可能跟GCT組織中大量破骨細胞樣多核巨細胞的形成有關.2.GT-55、GT-56細胞中僅有大量OPG mRNA表達,而缺乏ODF和RANK mRNA的表達,可能與GCT細胞培養(yǎng)傳代后多核巨細胞的逐漸減少和消失有關.3.GCT組織單核基質細胞和多核巨細胞及GT-56單個核基質細胞中均有ODF、OPG蛋白的表達,ODF陽性細胞以梭形單個核基質細胞為主,且單核基質細胞ODF與多核巨細胞OPG蛋白表達間呈正相關.4