傳統(tǒng)中藥白背葉和鵝絨委陵菜的化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、本文選取了兩種傳統(tǒng)中藥白背葉[Mallotusapelta(Lour.)Muell.-Arg.]和鵝絨委陵菜(PotentillaanserineL.)，對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分及生物活性研究。 白背葉[Mallotusapelta(Lour.)Muell.-Arg.]為大戟科(Euphorbiaceae)野桐屬(Mallotus)植物，分布于我國(guó)廣西、海南等南方地區(qū)，是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，用于治療慢性肝炎、口瘡、外傷出血等。我們?cè)?/p>

2、對(duì)白背葉進(jìn)行保肝活性篩選時(shí)，發(fā)現(xiàn)乙醇提取物及各萃取部位均具有一定的保肝活性，其中以乙醇提取物和正丁醇部位活性為最強(qiáng)；抗腫瘤活性篩選發(fā)現(xiàn)石油醚部位具有一定的細(xì)胞毒活性。 為了闡明白背葉的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，我們對(duì)白背葉根進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，運(yùn)用多種分離方法和波譜學(xué)技術(shù)共分離鑒定了24個(gè)化合物，包括6個(gè)香豆素苯丙素復(fù)合體類化合物、2個(gè)倍半萜類化合物、1個(gè)香豆素類化合物、1個(gè)木脂素類化合物、1個(gè)黃酮類化合物、2個(gè)酚苷類化合物、2個(gè)神經(jīng)

3、酰胺類化合物、6個(gè)三萜類化合物、3個(gè)甾醇類化合物。其中4個(gè)化合物為新化合物(M1～M3為香豆素苯丙素復(fù)合體類化合物、M7為倍半萜類化合物)，M5、M8、M10-M19、M21等13個(gè)化合物為首次從野桐屬中分離得到。這24個(gè)化合物是：malloapelinA(M1)、malloapelinB(M2)、malloapelinC(M3)、5'-demethylaquillochin(M4)、cleomiscosinsA(M5)、cleomis

4、cosinsB(M6)、malloapelinD(M7)、dearabinosylpneumonathoside(M8)、東莨菪內(nèi)酯(M9)、槲皮素(M10)、schizandriside(M11)、3-甲氧基-4-O-β-D-葡萄糖基苯甲酸(M12)、berchemolide(M13)、1-O-β-D-glucopy-ranosyl-(2S，3R，4E，8Z)-2-[(2-hyaroxyhexadecanoyl)amido]-4，8-

5、octadecadiene-1，3-diol(M14)、1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S，3R，4E，8E)-2-[(2-hydroxyoctadecanoyl)amido]-4，8-octadecadiene-1，3-diol(M15)、β-香樹脂醇乙酸酯(M16)、高根二醇(M17)、lup-20(29)-en-3β，30-diol(M18)、2α-hydroxyaleuritolicacid3-p-hydrox

6、ybenzoate(M19)、α-香樹脂醇乙酸酯(M20)、油桐酸(M21)、β-谷甾醇(M22)、胡蘿卜苷(M23)、豆甾醇(M24)。對(duì)香豆素苯丙素復(fù)合體類化合物的生源途徑進(jìn)行了初步研究，假定了一條6,7，8-三羥基香豆素與3-甲氧基咖啡醇的自由基氧化偶連的生源途程，解釋了得到的香豆素苯丙素復(fù)合體類化合物旋光值為零的問題。 對(duì)分離得到的3個(gè)香豆素苯丙素復(fù)合體類新化合物進(jìn)行了多種生物活性篩選：保肝活性篩選結(jié)果表明，化合物M1-

7、M3對(duì)半乳糖胺引起的大鼠肝臟內(nèi)皮細(xì)胞損傷都具有一定的抑制作用，給藥濃度為10-4M時(shí)抑制率分別為3.5％、11.3％、26.2％；在抗腫瘤活性篩選時(shí)，發(fā)現(xiàn)化合物M2對(duì)人胃癌細(xì)胞(BGC-823)具有細(xì)胞毒作用(IC50為0.74μM)，化合物M3對(duì)人肺腺癌細(xì)胞(A549)和人卵巢癌細(xì)胞(A2780)均具有細(xì)胞毒作用(IC50分別為0.65和0.43μM)；抗HIV活性篩選未發(fā)現(xiàn)化合物M1～M3具有抗病毒活性。 鵝絨委陵菜(Pot

8、entillaanserineL.)為薔薇科(Rosaceae)委陵菜屬(Potentilla)植物，分布于我國(guó)北方各省及西南的四川、云南、西藏等地，是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，用于治療吐血、瘧疾癰瘡、脾虛腹瀉等癥，民間還用于治療糖尿病。在抗糖尿病活性篩選時(shí)，發(fā)現(xiàn)鵝絨委陵菜乙醇提取物及各萃取部位均具有一定的蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。 利用各種現(xiàn)代分離方法和波譜學(xué)技術(shù)，對(duì)鵝絨委陵菜進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成

9、分研究，分離鑒定了53個(gè)化合物，包括23個(gè)黃酮類化合物、3個(gè)單萜類化合物、1個(gè)倍半萜類化合物、1個(gè)三萜類化合物、17個(gè)多酚類化合物、3個(gè)綠原酸衍生物、2個(gè)甾醇類化合物和3個(gè)其它類化合物。其中2個(gè)化合物(P1、P2)為新化合物，化合物P1為少見的由μ-truxinicacid基團(tuán)相連接的雙黃酮類化合物；化合物P2為單萜類化合物。P4～P7、P9～P13、P15～P16、P18～P19、P21～P22、P24～47、P51～P53等42個(gè)化

10、合物為首次從委陵菜屬中分離得到。這53化合物是：potentilin(P1)、2,6-dimethyl-2，3-dihydro-4-OXO-4H-pyran-2-aceticacid(P2)、kaempferol-3-O-β-D-(6-O-trans-p-coumaroyl)glucopyranoside(P3)、kaempferol-3-O-β-D-(2-O-trans-p-coumaroyl)glucopyranoside(P4)、

11、apigenin-6-C-(2”-O-α-L-rhamnopy-ranosyl-β-D-glucopyranoside)(P5)、vicenin-Ⅱ(P6)、apigenin-6-C-β-D-glucopyranosyl-8-C-β-D-xylopyranoside(P7)、schaftoside(P8)、isovitexin(P9)、蘆丁(P10)、quercetin-3，7-di-O-β-D-glucopyranoside(P11)

12、、isoscutellarein-8-O-β-D-glucopyranoside(P12)、luteolin-3’-O-β-D-glucopyranoside(P13)、luteolin-7-O-β-D-glucuronide(P14)、luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside(P15)、quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside(P16)、黃芪苷(P17)、reynoutrin(P18)

13、、quercetin-3-O-β-D-glucuronide(P19)、isoquercitrin(P20)、quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside(P21)、木樨草素(P22)、槲皮素(P23)、5,7-二羥基色原酮(P24)、loliolide(P25)、isololiolide(P26)、dehydrocomifoliol(P27)、ellagicacid4-O-β-D-glucopyranoside

14、(P28)、ellagicacid4-O-β-D-xylopyranoside(P29)、3'-O-methylellagicacid4-O-β-D-glucopyranoside(P30)、短葉蘇木酚酸(P31)、短葉蘇木酚(P32)、vanillicacid4-O-β-D-glucopyrano-side(P33)、picein(P34)、4-glucosyloxybenzoicacid(P35)、3，4-二羥基苯甲酸(P36)、咖

15、啡酸(P37)、對(duì)羥基肉桂酸(P38)、對(duì)羥基苯甲酸(P39)、3,4-二羥基苯甲酸乙酯(P49)、丁香酸(P41)、β-hydroxypropiovanillone(P42)、對(duì)羥基苯甲醛(P43)、對(duì)羥基苯乙酮(P44)、綠原酸(P45)、4-O-caffeoylquinicacid(crytochlorogenicacid，P46)、5-O-caffeoylquinicacid(neochlorogenicacid，P47)、熊果

16、酸(P48)、β-谷甾醇(P49)、胡蘿卜苷(P50)、5-羥甲基糠醛(P51)、反式丁烯二酸(P52)、琥珀酸單乙酯(P53)。運(yùn)用HPLC-DAD和LC-MS分析技術(shù)，獲得了鵝絨委陵菜甲醇提取物的紫外(UV)和質(zhì)譜(MS)圖，結(jié)合從鵝絨委陵菜乙醇提取物中分離出的53個(gè)化合物，對(duì)相關(guān)峰進(jìn)行了指認(rèn)，為規(guī)范鵝絨委陵菜的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，避免該屬植物由于外觀形態(tài)的類似而產(chǎn)生混用的現(xiàn)象提供科學(xué)依據(jù)。 藥理活性篩選結(jié)果表明：(1)鵝絨委陵菜

17、中化合物P3、P4、P10、P11、P29和P48均具有一定的蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制活性，在給藥濃度為10μM時(shí)，抑制率分別達(dá)到51.0、51.7、30.4、45.9、64.1和34.4％。(2)抗炎活性篩選結(jié)果顯示鵝絨委陵菜乙醇提取物石油醚部位、乙酸乙酯部位和水部位在100mg/kg劑量皮下給藥時(shí)可明顯抑制巴豆油引起的小鼠耳腫脹，抑制率分別為21.8、44.9和66.4％。(3)抗腫瘤活性篩選結(jié)果顯示乙酸乙酯部位對(duì)人結(jié)

18、腸癌細(xì)胞(HCT-8)、人肝癌細(xì)胞(Bel-7402)、人胃癌細(xì)胞(BGC-823)、人肺腺癌細(xì)胞(A549)和人卵巢癌細(xì)胞(A2780)都具有細(xì)胞毒作用，IC50值分別為2.34、26.93、7.54、13.06和25.88μg/mL；石油醚部位對(duì)人肝癌細(xì)胞和人胃癌細(xì)胞具有一定的選擇性細(xì)胞毒作用，其IC50值分別為19.89和17.78μg/mL；該植物中含量較高的化合物P48(熊果酸)對(duì)人肺腺癌細(xì)胞和人卵巢癌細(xì)胞也具有一定的選擇性細(xì)