大鼠皮質(zhì)脊髓束與紅核脊髓束定位損傷-腦組織學(xué)變化的差異性研究.pdf

1、目的:驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)組雙側(cè)紅核脊髓束和雙側(cè)皮質(zhì)脊髓背側(cè)束的定位損傷模型,通過(guò)尼氏染色和免疫組化的方法,觀察不同進(jìn)化程度的中樞神經(jīng)纖維損傷后,相應(yīng)腦組織學(xué)變化的初期表現(xiàn)。
　　 材料和方法:利用自制損傷刀片改良制備SD大鼠頸脊髓雙側(cè)皮質(zhì)脊髓束背側(cè)束(dCST)、紅核脊髓束(RST)精確定位損傷模型,并通過(guò)BBB評(píng)分,BDA順行示蹤驗(yàn)證模型。模型驗(yàn)證成功后將18只SD雌性大鼠,隨機(jī)分為dCST-2周組(n=3)、dCST-3周組(n=3

2、)、RST-2周組(n=3)、RST-3周組(n=3)及假手術(shù)對(duì)照組(n=3)5組。前4組分別進(jìn)行頸脊髓背側(cè)皮質(zhì)脊髓束或紅核脊髓束精確定位損傷,假手術(shù)對(duì)照組采取椎板咬除術(shù),不進(jìn)行脊髓損傷。造模成功后第2、3周分別對(duì)各組大鼠進(jìn)行升主動(dòng)脈灌流固定、提取腦組織,進(jìn)行冰凍切片,經(jīng)過(guò)尼氏染色和免疫組化分析,統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果:造模通過(guò)BDA順行示蹤顯示皮質(zhì)脊髓束背側(cè)束(dCST)和紅核脊髓束(RST)完全中斷,示

3、造模成功。兩實(shí)驗(yàn)組在損傷后2W時(shí)間點(diǎn)活性細(xì)胞數(shù)與假手術(shù)組比較均有減少,3W時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞數(shù)目可見(jiàn)回升,但均少于假手術(shù)組。損傷后RST2w大鼠神經(jīng)細(xì)胞存活率較dCST2w組低,但dCST3W與RST3W之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。免疫組化結(jié)果顯示RST組與dCST組tubulin-α表達(dá)在損傷后2W時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組對(duì)比均有降低,損傷后3W時(shí)間點(diǎn)表達(dá)均有回升,整個(gè)損傷后過(guò)程中dCST組tubulin-α表達(dá)高于RST組,但兩組數(shù)據(jù)組間相對(duì)tubulin

4、-α表達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無(wú)差異(p＞0.05)。RST組與dCST組GAP-43表達(dá)趨勢(shì)大致相同,表現(xiàn)為先升高后略降的過(guò)程,RST組GAP-43表達(dá)較dCST組維持在更高水平,兩組數(shù)據(jù)組間統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有差異(p＜0.05)。
　　 結(jié)論:進(jìn)化程度不同的RST與dCST損傷后在相應(yīng)腦組織學(xué)改變上存在差異,在活性細(xì)胞計(jì)數(shù)與GAP-43表達(dá)上,RST損傷組優(yōu)于dCST損傷組。而在神經(jīng)修復(fù)其他因素方面RST損傷組是否亦優(yōu)于dCST損傷組,以及R