大鼠皮質脊髓束的應用解剖學研究.pdf

1、第一部分皮質脊髓束在大鼠脊髓內的精確定位 目的：確定大鼠皮質脊髓束在延髓和脊髓白質內的走行和精確定位。 方法：選用成年SD大鼠，采用Luxolfastblue(LFB)染色法和proteinkinaseCγ(PKCY)特異性抗體免疫組織化學染色法在冠狀面、矢狀面、橫斷面三種不同切面上對正常大鼠皮質脊髓束進行解剖定位。結果：在延髓錐體中，LFB染色標記的深藍色的有髓纖維經錐體交叉至脊髓頸、胸、腰、骶段后索腹側，與周圍淡染的

2、纖維易于區(qū)別；PKCγ陽性反應產物呈棕色，分布于延髓腹側面的錐體中，在延髓錐體下部絕大部分交叉到背側面，在脊髓白質內沿后索腹側下行，至脊髓的骶尾段。同時延髓和脊髓背角神經元中也有PKCγ免疫陽性物質存在，在脊髓前索和外側索未見有PKC丫陽性反應產物。LFB陽性纖維和PKCγ免疫陽性反應產物在延髓錐體和脊髓后索內的定位分布與大鼠皮質脊髓束在延髓和脊髓中的位置和走行相一致。結論：運用LFB染色和PKCY特異性抗體免疫組織化學染色可以清晰對正

3、常大鼠皮質脊髓束進行精確解剖定位，為進一步研究皮質脊髓束的損傷和功能重建提供形態(tài)學基礎。 第二部分大鼠皮質脊髓束半橫段損傷模型的建立 目的：成功制作大鼠皮質脊髓束半橫斷損傷模型。方法：選擇性切割大鼠延髓左側錐體，建立大鼠皮質脊髓束半橫斷損傷模型，采用斜板實驗進行行為學檢測，運用LFB染色法、生物素化葡聚糖胺(BDA)神經示蹤法和PKCY免疫組織化學染色法對模型進行形態(tài)學評判。結果：皮質脊髓束損傷組大鼠術后右側前后肢癱瘓，

4、斜板實驗顯示運動功能受限；LFB染色可以看出損傷部位左側皮質脊髓束無LuxolFastBlue濃染神經纖維束；BDA神經示蹤法結果顯示在錐體交叉平面，僅見一束BDA陽性反應產物經右側交叉至左側，在脊髓后索的左側半下行至骶尾段，而在損傷平面以下，未見有BDA陽性反應產物經左側錐體交叉至右側，在整個脊髓后索的右側半未見有BDA陽性反應產物。PKCγ免疫組織化學染色結果發(fā)現(xiàn)延髓錐體右側半有一束PKCγ陽性反應產物經右側交叉至左側，脊髓后索腹側

5、部左側半有PKC丫陽性反應產物，而脊髓后索腹側部右側半未見有PKCγ陽性反應產物。結論：選擇在延髓切斷一側錐體制作皮質脊髓束半橫斷損傷模型，定位準確，重復性好，結果可靠，是研究皮質脊髓束的可塑性和神經軸突再生的理想動物模型。BDA神經束路示蹤法和PKC7免疫組織化學染色法可作為皮質脊髓束半橫斷損傷模型的形態(tài)學指標。 第三部分大鼠皮質脊髓束半橫斷損傷后皮質脊髓束超微結構的變化 目的：觀察皮質脊髓束半橫斷損傷后皮質脊髓束超微

6、結構的變化。方法：選擇性切割大鼠延髓左側錐體，建立皮質脊髓束半橫斷損傷模型，模型制作后4d、14d、28d，采用透射電鏡觀察受損皮質脊髓束超微結構的變化。結果：皮質脊髓束半橫斷損傷后，受損皮質脊髓束髓鞘和軸索發(fā)生腫脹，形態(tài)不規(guī)則。隨著時間的延長，潰變進行性加重，受損皮質脊髓束主要表現(xiàn)為髓鞘破壞、溶解及軸索脫髓鞘病變、胞漿濃縮、細胞器增多及空泡樣變性。脊髓頸、胸、腰段受損皮質脊髓束的潰變比損傷部位嚴重。結論：皮質脊髓束半橫斷損傷后，受損皮