干細胞標記物CD133的唾液酸化修飾及功能的研究.pdf

1、CD133(prominin-1)屬于五次跨膜蛋白prominin家族的一個成員，廣泛表達于哺乳動物細胞各種胚胎上皮、成體上皮和非上皮細胞，比如造血干細胞表面。近年來，研究發(fā)現(xiàn)在人的多種腫瘤組織中，CD133特異性地表達在一小群能夠造成腫瘤發(fā)生、復發(fā)以及轉移的特殊腫瘤細胞，即腫瘤干細胞上。因此，CD133被廣泛用于鑒定和分離腫瘤干細胞以進一步研究如何殺滅腫瘤干細胞。但是，CD133具體的生物學功能尚不清楚，有研究發(fā)現(xiàn)CD133作為腫瘤干

2、細胞標志的功能可能和其糖基化相關。
　　唾液酸化是常見的蛋白糖鏈末端修飾。唾液酸化修飾具有廣泛的生物學功能，包括病毒對細胞的感染，細胞間相互作用，腫瘤的轉移以及調(diào)節(jié)蛋白的穩(wěn)定性。
　　我們的研究發(fā)現(xiàn)：腫瘤干細胞標記物蛋白CD133存在末端唾液酸化修飾從而利于其穩(wěn)定性。我們首先用神經(jīng)氨酸酶處理無論是高表達內(nèi)源性CD133的神經(jīng)干細胞和人腦膠質(zhì)瘤起始細胞，發(fā)現(xiàn)經(jīng)酶處理后，CD133的分子量明顯降低。接著我們在人腦膠質(zhì)瘤細胞系U8

3、7MG中穩(wěn)定表達外源性的CD133，用神經(jīng)氨酸酶處理后同樣發(fā)現(xiàn)外源表達的CD133分子量明顯降低，提示CD133存在唾液酸化。接著我們進一步明確了唾液酸是以α2，3糖苷鍵的方式加載到CD133的N-糖鏈末端。此外我們還發(fā)現(xiàn)膜蛋白CD133是通過溶酶體途徑降解的。去除末端唾液酸化能夠明顯促進溶酶體對CD133的降解。
　　總上所述，我們發(fā)現(xiàn)腫瘤干細胞標記物蛋白CD133存在末端唾液酸化修飾，這種修飾利于CD133的穩(wěn)定性。同時我們的