被動(dòng)吸煙兒童頭發(fā)尼古丁含量測(cè)定及其應(yīng)用.pdf

1、被動(dòng)吸煙，或稱環(huán)境煙草煙霧(environmental tobacco smoke，ETS)暴露，是指不吸煙者吸入吸煙者呼出的香煙煙霧，它是室內(nèi)環(huán)境危險(xiǎn)暴露之一。據(jù)我國(guó)對(duì)51萬(wàn)人吸煙情況的抽樣調(diào)查，被動(dòng)吸煙危害人數(shù)達(dá)40％，受害場(chǎng)地：一是家庭，二是公共場(chǎng)所。ETS和癌癥、心血管疾病以及呼吸道感染等發(fā)病率密切相關(guān)。長(zhǎng)期暴露于香煙煙霧可引起肺癌以及鼻竇癌、子宮頸癌、乳腺癌和膀胱癌。此外，香煙中的苯、鉛、錳和PAH等多種有害物質(zhì)還可對(duì)女性生殖

2、系統(tǒng)產(chǎn)生損害作用。 香煙煙霧的主要受害者是兒童及青少年。暴露于香煙煙霧的被動(dòng)吸煙可能導(dǎo)致某些小兒疾病日益增多，如支氣管炎及肺發(fā)育不良、呼吸道感染、肺功能減低、哮喘、兒童癌癥、中耳炎等，父母吸煙者其子女在兒童期呼吸道癥狀和呼吸功能的改變明顯高于無(wú)吸煙者。一些研究顯示被動(dòng)吸煙可增加?jì)雰衡谰C合征、早產(chǎn)、低出生體重兒的發(fā)生。其它與香煙煙霧有關(guān)的健康問(wèn)題有兒童認(rèn)知與行為異常等，被動(dòng)吸煙會(huì)影響兒童智力，并導(dǎo)致行為問(wèn)題，有資料表明母親在懷孕

3、期間吸煙的兒童出現(xiàn)行為問(wèn)題的幾率比那些母親在懷孕期間不吸煙的兒童要高得多。 在很多有關(guān)ETS暴露的流行病學(xué)研究中，ETS暴露與否主要通過(guò)調(diào)查問(wèn)卷來(lái)判定，因此影響評(píng)價(jià)結(jié)果的可靠性。采用較為客觀的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量指標(biāo)來(lái)保證調(diào)查結(jié)果的真實(shí)有效是必要的。在一系列有關(guān)ETS暴露的評(píng)價(jià)指標(biāo)中，現(xiàn)在較為廣泛使用測(cè)定體液(血液、唾液、尿)中可鐵寧(cotinine)的濃度來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)。Cotinine是人體吸入煙草煙霧中尼古丁后經(jīng)肝臟時(shí)其吡咯烷環(huán)被氧化

4、的主要代謝產(chǎn)物，是判定被動(dòng)吸煙比較客觀而又特異的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。由于體液中可鐵寧的半衰期較短，只可用來(lái)測(cè)量數(shù)天內(nèi)ETS的累積暴露量，而頭發(fā)中尼古丁含量的分析可提供較長(zhǎng)時(shí)間(甚至數(shù)月)內(nèi)暴露于ETS的信息，因?yàn)轭^發(fā)的平均生長(zhǎng)速度為1厘米／月左右。 頭發(fā)中尼古丁含量的測(cè)定國(guó)外采用放射免疫法(RIA)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)和高效液相色譜-電化學(xué)檢測(cè)(HPLC-ECD)等方法。放射免疫法(RIA)需要使用兩種放射性同位素<'

5、125>I和<'3>H，盡管放射免疫法易于操作，但采用放射免疫法測(cè)定的結(jié)果比采用色譜法的結(jié)果高出30～50％，原因是由于與尼古丁其它的代謝物交叉反應(yīng)而使測(cè)定結(jié)果偏高，產(chǎn)生的大量放射性廢液的處理也是一個(gè)令人關(guān)心的問(wèn)題。色譜法技術(shù)特異性好且靈敏度高，可以同時(shí)測(cè)定頭發(fā)中的尼古丁和可鐵寧，與放射免疫法相比，色譜法不易受其它因素的影響。國(guó)外普遍采用濃NaOH和混合溶劑提取或用溶劑反復(fù)提取的方法，采用氣相色譜分離，然后用質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)。由于質(zhì)譜儀的

6、成本較高，我國(guó)基層單位的氣相色譜儀一般不配備此檢測(cè)器。高效液相色譜法洗脫時(shí)間較長(zhǎng)，且使用對(duì)人體有毒有害的有機(jī)溶劑，并易對(duì)環(huán)境造成污染。因此，建立一種快速、靈敏、特異的測(cè)定被動(dòng)吸煙者頭發(fā)中尼古丁含量的方法就具有現(xiàn)實(shí)的意義。 研究目的 1、檢測(cè)兒童被動(dòng)吸煙狀況下發(fā)樣中尼古丁含量反映其內(nèi)暴露量 2、建立GC／FID測(cè)定被動(dòng)吸煙兒童頭發(fā)中尼古丁的定性、定量分析方法及應(yīng)用該方法測(cè)定頭發(fā)樣本的尼古丁含量 3、 實(shí)驗(yàn)室

7、檢測(cè)結(jié)果與問(wèn)卷調(diào)查反映的健康效應(yīng)進(jìn)行相關(guān)性分析 研究方法隨機(jī)抽取廣州市兩所小學(xué)共530名小學(xué)生(9～12歲)作為研究對(duì)象，采用統(tǒng)一的調(diào)查問(wèn)卷，包括學(xué)生問(wèn)卷和家長(zhǎng)問(wèn)卷，其中家長(zhǎng)問(wèn)卷由主卷和確認(rèn)書(shū)組成，同時(shí)對(duì)其家長(zhǎng)在確認(rèn)書(shū)上表示同意采集頭發(fā)和血樣并簽字的學(xué)生進(jìn)行頭發(fā)樣本及血樣的采集。調(diào)查項(xiàng)目包括兒童的一般情況、有關(guān)父母及家人的吸煙行為、被動(dòng)吸煙對(duì)兒童健康的影響等，并對(duì)兒童進(jìn)行血清免疫學(xué)指標(biāo)和頭發(fā)尼古丁含量的測(cè)定。血清免疫球蛋白IgE

8、和細(xì)胞因子IL-8的濃度分別用晶美生物工程(北京)有限公司生產(chǎn)的人IgE ELISA試劑盒和人IL-8 ELISA試劑盒進(jìn)行測(cè)定。頭發(fā)樣本剪碎后用3ml 3mol／LNaOH溶液，于80℃水浴1小時(shí)水解后，加入喹啉作為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，用乙醚直接提取兩次后，在45℃水浴下氮?dú)獯蹈珊笥?0 μl甲醇重新溶解殘留物經(jīng)Rtx-5毛細(xì)管柱分離，火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)尼古丁含量。根據(jù)WH0對(duì)被動(dòng)吸煙的定義，把符合條件的作為被動(dòng)吸煙暴露組，其余的為非暴露組，

9、而兒童被動(dòng)吸煙的暴露情況以及暴露量可通過(guò)調(diào)查問(wèn)卷來(lái)確認(rèn)。采用卡方檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法結(jié)果和問(wèn)卷調(diào)查方法結(jié)果進(jìn)行一致性分析。 研究結(jié)果 本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)兒童被動(dòng)吸煙率為35.6％，兒童ETS暴露場(chǎng)所主要是在家庭，而且主要來(lái)自父親吸煙，大部分兒童在家人吸煙時(shí)會(huì)采取不同的回避措施。被動(dòng)吸煙組兒童的血清IgE含量顯著高于非被動(dòng)吸煙組，而其IL-8含量則明顯比非被動(dòng)吸煙組低。調(diào)查結(jié)果還沒(méi)有證據(jù)表明受到ETS暴露的兒童的呼吸道疾病的發(fā)生

10、率比沒(méi)有受到ETS暴露的兒童要高。 建立了GC／FID測(cè)定兒童頭發(fā)中尼古丁的定性、定量分析方法，該檢測(cè)方法尼古丁的回收率在87.4％～100.4％之間，最低檢出限為0.1 μg／mL。本實(shí)驗(yàn)共測(cè)定了112例兒童頭發(fā)樣品(包括有環(huán)境煙草煙霧暴露和沒(méi)有環(huán)境煙草煙霧暴露)，其中有環(huán)境煙草煙霧暴露兒童頭發(fā)尼古丁濃度中位數(shù)為2.668ng／mg；沒(méi)有環(huán)境煙草煙霧暴露兒童頭發(fā)尼古丁濃度中位數(shù)為0.357ng／mg，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者之間的差

11、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)與暴露組兒童相對(duì)應(yīng)的家長(zhǎng)問(wèn)卷中有關(guān)吸煙情況進(jìn)行分析，根據(jù)調(diào)查問(wèn)卷中有關(guān)家人每天吸煙數(shù)量，把暴露組分為低暴露組(<10支／天)(n=21)、中強(qiáng)度暴露組(10～20支／天)(n=29)、高暴露組(>20支／天)(n=12)三組。低暴露量(<10支／天)組與中強(qiáng)度暴露量(10～20支／天)組之間兒童頭發(fā)尼古丁含量差別沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但這兩組均與高暴露量(>20支／天)組之間兒童頭發(fā)尼古丁差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果表明，監(jiān)測(cè)兒童

12、頭發(fā)中的尼古丁含量在一定程度上反映了其環(huán)境煙草煙霧暴露量。頭發(fā)中尼古丁檢測(cè)結(jié)果和問(wèn)卷調(diào)查中的ETS暴露量有較好的一致性，Kappa=O.621，本次問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果基本上反映了兒童被動(dòng)吸煙的情況。 結(jié)論 1、兒童被動(dòng)吸煙率為35.6％，兒童ETS暴露場(chǎng)所主要是在家庭，而且主要來(lái)自父親吸煙，大部分兒童在家人吸煙時(shí)會(huì)采取不同的回避措施。被動(dòng)吸煙組兒童的血清IgE含量顯著高于非被動(dòng)吸煙組，而其IL-8含量則明顯比非被動(dòng)吸煙組低。調(diào)