瀘州地區(qū)青蒿的含量測(cè)定及其種植資源研究.pdf

1、目的：本課題為瀘州市科技局課題“瀘州地區(qū)青蒿的種植及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究”的一部分。青蒿(HerbaArtemisiaeAnnuae)是我國的傳統(tǒng)中藥，為菊科(Asteraceae)蒿屬(Artemisia)植物黃花蒿(ArtemisiaannuaL.)的干燥地上部分。二十世紀(jì)七十年代我國科技工作者首次從青蒿中分離出抗瘧單體——青蒿素(Artemisinin，Qinghaosu，QHS)，為抗瘧特效藥，同時(shí)對(duì)血吸蟲病、艾滋病等也有一定療效。從天

2、然黃花蒿中提取青蒿素是目前獲取青蒿素的唯一來源。目前栽培的黃花蒿由野生黃花蒿直接引種，產(chǎn)量低，尤其是青蒿素含量低。由于遺傳差異，單株之間青蒿素含量差異大。培育青蒿素含量高且穩(wěn)定的青蒿栽培品種必將大大提高經(jīng)濟(jì)效益。本課題對(duì)瀘州地區(qū)青蒿進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的部分研究工作。包括：1.瀘州地區(qū)青蒿中有效成分青蒿素的含量測(cè)定方法研究。旨在為瀘州地區(qū)青蒿藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供科學(xué)的資料與數(shù)據(jù)。2.青蒿素精制品的含量測(cè)定方法研究。旨在為青蒿素精制品的含量測(cè)

3、定建立新方法。3.瀘州地區(qū)青蒿中青蒿素的提取方法研究。旨在更經(jīng)濟(jì)高效地從瀘州地區(qū)青蒿藥材中提取青蒿素。4.瀘州地區(qū)青蒿的種植資源研究。旨在為建立瀘州地區(qū)青蒿藥材的GAP(中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范)標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)的資料與數(shù)據(jù)。 方法：1.采用柱前衍生-反相高效液相色譜法(Precolumn-RP-HPLC)測(cè)定瀘州地區(qū)青蒿藥材中青蒿素的含量。由于青蒿素僅在紫外區(qū)203nm處有較弱的末端吸收，不適宜直接進(jìn)樣測(cè)定。因此采用柱前衍生反應(yīng)，使

4、青蒿素定量地轉(zhuǎn)化為化合物Q260，該物質(zhì)在260nm處有最大吸收，可以用于做HPLC測(cè)定。最佳色譜條件為：采用KromasilC18(250×4.6mm，5μm，Dikma)柱，流動(dòng)相為甲醇-0.01mol/L醋酸鈉-醋酸緩沖液(pH=5.9)(體積比55∶45)，檢測(cè)波長260nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃。2.采用反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測(cè)定青蒿素精制品的含量。最佳色譜條件為：采用KromasilC18(250

5、×4.6mm，5μm，Dikma)柱，流動(dòng)相為乙腈-超純水(體積比75∶25)，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長220nm，柱溫30℃。3.對(duì)瀘州地區(qū)青蒿藥材進(jìn)行冷浸提取法、回流提取法、索氏提取法、超聲波提取法的實(shí)驗(yàn)比較。采用單因素試驗(yàn)對(duì)青蒿藥材中青蒿素的提取工藝進(jìn)行優(yōu)選。4.對(duì)同一試驗(yàn)基地的不同品種青蒿藥材測(cè)定其青蒿素含量。 結(jié)果：1.建立了一種新的測(cè)定青蒿藥材中青蒿素的Precolumn-RP-HPLC法。青蒿素在0.093

6、μg～0.93μg范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為99.9％，RSD=1.1％。2.建立了一種新的測(cè)定青蒿素精制品的RP-HPLC法。青蒿素在2.66μg～53.2μg范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為100.1％，RSD=0.98％。3.確定了一種從青蒿藥材中提取青蒿素較理想的工藝。從提取率和含量考慮，索氏提取法為最佳。對(duì)幾種溶劑進(jìn)行比較，石油醚最好。4.初步研究了瀘州地區(qū)青蒿藥材的種