聯(lián)合重組纖維連接蛋白活化異基因殺傷細(xì)胞過繼治療腎癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、Y1414270博士學(xué)位論文聯(lián)合重組纖維連接蛋白活化異基因殺傷細(xì)胞過繼治療腎癌的實(shí)驗(yàn)研究學(xué)校代碼：l∞23學(xué)號(hào)：zB2005015ResearchofadoptiVetraⅡsfbrringaUogenicRetroNectiⅡactiVatedldUerinrenalcancerinvitroandinvivo所院：姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)院田軍李漢忠教授馬建輝教授馬潔教授泌尿外科腎癌的過繼細(xì)

2、胞免疫治療2008年6月6日將取自2例腎癌患者的腎腫瘤進(jìn)行腎癌原代細(xì)胞培養(yǎng)；采集健康志愿者和腎癌患者外周血分別培養(yǎng)RAK細(xì)胞，體外殺傷HLAA2陽性的腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系l地CLSL、RCCFTL以及2株腎癌原代細(xì)胞，乳酸脫氫酶法定量檢測(cè)黜～K細(xì)胞體外殺傷腎癌細(xì)胞的能力。結(jié)果①RAK培養(yǎng)第14天時(shí)細(xì)胞呈集落樣活化狀態(tài)，形成以細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CD3CD8)為主(占67％)的細(xì)胞群；CD3CD25細(xì)胞明顯增多、CD25(IL一2受體)表達(dá)上調(diào)

3、：凡墩細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)明顯高于CD3AK細(xì)胞，二者培養(yǎng)第14天時(shí)分別擴(kuò)增423倍及50倍(po05)。②健康人與腎癌患者來源的I乙～K細(xì)胞培養(yǎng)第14天時(shí)，擴(kuò)增倍數(shù)分別為47l倍及318倍，CD3CD8T細(xì)胞的比例分別為6668％及5545％，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(po05)；培養(yǎng)上清液中的IFNY及TNFQ濃度無顯著差異①分別為032及O40)。③高劑量和低劑量異基因融氣K治療組腫瘤平均體積的增長均低于IL2對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組；荷瘤35

4、天時(shí)高劑量AlloRAK治療組裸鼠平均瘤重(0333O263克)明顯低于低劑量Allo＆～K治療組(13540193克)、IL一2治療組(11130254克)及生理鹽水治療組(1100O560克)(p值分別為O040、0026及O048)，高劑量觸lom～K治療組的抑瘤率為697％；低劑量Allo黜～K治療組瘤重也低于IL2治療組及生理鹽水治療組，但差異未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(p值分別為O413及0253)；④燦loRAK對(duì)人腎透明細(xì)胞癌細(xì)

5、胞系IⅪCLSL、RCCFTL及2株腎癌原代細(xì)胞具有明顯的殺傷作用，效靶比為375：1、75：1及150：l時(shí)，殺傷腎癌細(xì)胞的比率分別為680％～7169％、1725％～7998％及2792％～8348％。結(jié)論聯(lián)合重組人纖維連接蛋白體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能顯著提高細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)，獲得大量的殺傷細(xì)胞；用健康人外周血培養(yǎng)的RAK細(xì)胞體外擴(kuò)增倍數(shù)及效應(yīng)細(xì)胞的比例均高于腎癌患者外周血培養(yǎng)的凡Ⅸ細(xì)胞；健康人來源的異基因m蛾細(xì)胞能在動(dòng)物體內(nèi)起到抑制腎腫瘤