IL-15基因轉(zhuǎn)染人CIK細(xì)胞過繼轉(zhuǎn)移治療胃癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了hIL-15-IRES-TK逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，并證實(shí)可有效轉(zhuǎn)染CIK細(xì)胞。其轉(zhuǎn)染可使CIK細(xì)胞自分泌白介素-15(IL-15)。鑒于逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染具有潛在的導(dǎo)致自身免疫疾病的危險(xiǎn)，同時(shí)表達(dá)的胸苷激酶基因(HSV-TK)可使被轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞在丙氧鳥苷(GCV)的處理下能被有效清除。這為hIL-15-TK病毒載體應(yīng)用于臨床CIK細(xì)胞過繼轉(zhuǎn)移治療腫瘤的安全性提供了重要的基礎(chǔ)。
　　 為了觀察hIL15-IRES-TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)

2、染的人源T細(xì)胞在體內(nèi)治療人源胃腸道腫瘤的療效，我們利用T細(xì)胞免疫缺陷小鼠(Balb/c-nu/nu鼠)以人的低分化胃腺癌細(xì)胞株BGC-823成功制備了人源胃癌細(xì)胞荷瘤小鼠模型，分別以hIL-15-IRES-TK逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染和未轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞在瘤體局部注射，1次/周，共2周，治療后觀察2周。以生理鹽水局部注射作為空白對(duì)照組。每周測(cè)量裸鼠腫瘤體積1次，4周后處死裸鼠，取出腫瘤組織稱重。
　　 經(jīng)過2周的治療，分別注射hIL-15

3、-IRES-TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染與非轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞的兩組荷瘤小鼠的腫瘤體積出現(xiàn)了顯著性差異，顯示出hIL-15-IRES—TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞比非轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞有更強(qiáng)的抑制腫瘤增長(zhǎng)的活性。在第3、4周，停止CIK治療后3組小鼠的腫瘤體積均有所增加，但hIL-15-IRES—TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染與非轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞組均小于生理鹽水組，說明CIK細(xì)胞過繼轉(zhuǎn)移治療具備一定的抑制腫瘤細(xì)胞的作用。而hIL-15-IRES—TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染與非轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞

4、兩組小鼠的腫瘤體積差異依然顯著，顯示出hIL-15-IRES—TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞比非轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞抑制腫瘤增長(zhǎng)的時(shí)效更長(zhǎng)。
　　 在實(shí)驗(yàn)過程中IL-15轉(zhuǎn)染CIK組開始治療后有兩只裸鼠腫瘤潰爛，第二周開始潰爛結(jié)疤，第四周潰爛愈合，腫瘤消失。對(duì)照組與CIK組則無此現(xiàn)象出現(xiàn)。這一現(xiàn)象也側(cè)面證實(shí)了IL-15-IRES-TK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞比非轉(zhuǎn)染的CIK細(xì)胞具備更強(qiáng)和更持續(xù)的殺瘤效應(yīng)。
　　 結(jié)論：實(shí)驗(yàn)表明CIK細(xì)