LIGHT基因轉(zhuǎn)染治療肝細(xì)胞性肝癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文LIGHT基因轉(zhuǎn)染治療肝細(xì)胞性肝癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名：侯洵申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：殷曉煜20070430中山大學(xué)磺士學(xué)位論文n師SF，rNFRSF結(jié)合后，TNFRSF成員的死亡結(jié)構(gòu)域活化Fas信號(hào)通路，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡；間接殺傷。即通過腫瘤細(xì)胞表面的TNFSF與T淋巴細(xì)胞表面的TNFRSF結(jié)合，提供共刺激信號(hào)，誘導(dǎo)特異性腫瘤免疫反應(yīng)，由活化的CD$T淋巴細(xì)胞間接殺傷腫瘤。由于后者的有效性和對(duì)正常組織的低毒

2、性，獲得了腫瘤學(xué)者的青睞。而尋找能誘導(dǎo)高特異性腫瘤免疫、低正常組織損害性的TNFSF仃NFRSF，是研究者的主要目標(biāo)。LIGHT基因正是這樣的TNFSF新成員之一，首先由Mauri等在1998年發(fā)現(xiàn)，人源uGHT(huGHT)是一個(gè)含有240個(gè)氨基酸殘基的II型膜蛋白，分子量為29kD。鼠源uGHT(Ⅱ以GHT)是239個(gè)氨基酸殘基形成的蛋白，分子量為2634kD，其氨基酸序列與bLIGHT的同源性為77％。LIGHT只在活化的淋巴細(xì)胞

3、、NK細(xì)胞、未成熟13(2上表達(dá)，能阻斷HVEM依賴的HSV感染，通過CD28非依賴途徑共刺激T淋巴細(xì)胞增殖、活化、殺傷，介導(dǎo)腫瘤免疫，促進(jìn)免疫系統(tǒng)的發(fā)育、胸腺陰性選擇和系統(tǒng)自穩(wěn)，影響自身免疫病，同種異體移植排斥反應(yīng)，以及移植物抗宿主病。LIGHT誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫主要與其兩種膜受體HVEM及LTI；R有關(guān)：LIGHT與淋巴細(xì)胞表面的HVEM結(jié)合能產(chǎn)生刺激細(xì)胞增殖和抗調(diào)亡的信號(hào)，并誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子；表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面的LIGHT尚

4、能起到共刺激因子的作用，有助于活化CDSffl【巴細(xì)胞：LIGHT與腫瘤間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的LT[JR結(jié)合能夠刺激間質(zhì)細(xì)胞釋放一系列趨化因子(chernokines)，后者能趨化CDS細(xì)胞進(jìn)入腫瘤組織，殺滅腫瘤細(xì)胞。目前已有實(shí)驗(yàn)研究表明，LIGHT基因轉(zhuǎn)染肥大細(xì)胞瘤P815細(xì)胞、纖維肉瘤Agl04Hd細(xì)胞可在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性抗腫瘤免疫，抑制腫瘤生長本研究擬通過陽離子脂質(zhì)體Lipofectamine2000的介導(dǎo)下將基因工程技術(shù)構(gòu)建的真核表達(dá)載體