血管生成素1基因轉(zhuǎn)染對胃癌細(xì)胞侵襲能力的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：為研究Ang-1對胃癌細(xì)胞侵襲能力有無影響，我們以腺病毒為載體，將Ang-1基因轉(zhuǎn)染至人胃癌細(xì)胞BGC-823，研究過表達(dá)Ang-1的人胃癌細(xì)胞BGC-823中uPA和MMP-2的表達(dá)情況，并了解胃癌侵襲能力及可能機(jī)制。 方法：利用腺病毒作為載體將已構(gòu)建成功的含Ang-1基因的重組腺病毒（Ad-Ang-1）瞬時(shí)轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞BGC-823，轉(zhuǎn)染編碼綠色熒光蛋白的復(fù)制缺陷型腺病毒重組體（Ad-GFP）為平行對照，未轉(zhuǎn)染的正常

2、細(xì)胞為空白對照，采用Transwell小室檢測細(xì)胞的侵襲能力；采用RT-PCR檢測三組細(xì)胞中MMP-2和uPA在mRNA水平表達(dá)的情況；采用Western blot檢測三組細(xì)胞中MMP-2和uPA在蛋白水平表達(dá)的情況；采用ELISA檢測三組細(xì)胞中培養(yǎng)上清和細(xì)胞中uPA的含量；采用Millicell小室檢驗(yàn)細(xì)胞的遷移能力。 結(jié)果：Millicell小室和Transwell小室結(jié)果顯示Ad-Ang-1組細(xì)胞的遷移和侵襲能力與其他兩組

3、比較均明顯提高，差異有顯著性，而Ad-GFP組和空白對照組比較差異無顯著性；RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示MMP-2和uPA在Ad-Ang-1組中mRNA和蛋白水平表達(dá)明顯高于Ad-GFP組和空白對照組（P<0．05）；ELISA結(jié)果顯示Ad-Ang-1組胃癌細(xì)胞培養(yǎng)上清和細(xì)胞中uPA蛋白的含量明顯高于Ad-GFP組和空白對照組（P<0．05）。 結(jié)論：過表達(dá)Ang-1的胃癌細(xì)胞遷移和侵襲能力均明顯提高，Ang-