血管生成素-1和特異性COX-2抑制劑對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲和轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、東南大學(xué)博士學(xué)位論文血管生成素1和特異性COX2抑制劑對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲和轉(zhuǎn)移的影響姓名：歐希龍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)；內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：陳寶安20110528東南大學(xué)博：學(xué)位論文和凋亡的影響并探討其可能的機(jī)制。方法：用NS398(培養(yǎng)液中NS398終濃度為100、200和400lamol／L)干預(yù)轉(zhuǎn)染Ang1前后的胃癌細(xì)胞株BGC823，通過M1vr法測定細(xì)胞的增殖；通過流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞的凋亡；使用半定量RTPCR

2、和Westernblot對(duì)不同濃度組中Ang1、VEGF一165、Bcl一2和Bax的mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)行分析。結(jié)果：NS一398干預(yù)后，MTT法顯示隨著濃度和干預(yù)時(shí)間的延長，BGC823細(xì)胞增殖能力下降；流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示細(xì)胞的凋亡增加；轉(zhuǎn)染Ang1基因后，細(xì)胞中Ang一1、VEGF165和Bcl一2mRNA和蛋白的表達(dá)明顯增加儼005)，細(xì)胞中BaxmRNA和蛋白的表達(dá)明顯降低儼o05)；用NS398干預(yù)后，轉(zhuǎn)染和未轉(zhuǎn)染A

3、ng—l基因結(jié)果均顯示，在高濃度組中，細(xì)胞中Angl、VEGF165和Bcl2mRNA和蛋白表達(dá)明顯低于低濃度組(Po05)，而BaxmRNA和蛋白表達(dá)明顯高于低濃度組儼005)；非轉(zhuǎn)染組細(xì)胞比轉(zhuǎn)染組細(xì)胞以上表達(dá)更明顯。結(jié)論：1轉(zhuǎn)染Ang一1基因的細(xì)胞株BGC823，它能提高細(xì)胞的增殖能力和抑制細(xì)胞的凋亡，它與上調(diào)Ang—l、VEGF165和Bcl一2基因的表達(dá)和下調(diào)Bax基因的表達(dá)有關(guān)。2NS398抑制BGC823細(xì)胞增殖具有劑量和時(shí)

4、間依賴性，它與下調(diào)細(xì)胞株中的Ang1、VEGF一165和Bcl2基因的表達(dá)和上調(diào)Bax基因的表達(dá)有關(guān)，抑制細(xì)胞的增殖和促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。3我們推測COX一2抑制劑NS一398通過抑制Ang一1基因表達(dá)是實(shí)現(xiàn)上述作用的重要途徑之一。作用機(jī)理可能是通過先抑制Ang—l基因，Ang一1基因表達(dá)降低后進(jìn)一步下調(diào)VEGF165和Bcl一2的表達(dá)，提高Bax的表達(dá)，從而抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。第三部分血管生成素1和特異性COX2抑制劑對(duì)人胃癌細(xì)胞