microRNA-423-5p調(diào)控TFF1基因表達(dá)及對胃癌細(xì)胞增殖侵襲能力的影響.pdf

1、胃癌相關(guān)基因與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，是胃癌預(yù)測的重要標(biāo)志，并且在胃癌不同的病理分期、病理分型及原發(fā)部位具有不同的基因表達(dá)特點及規(guī)律。三葉因子具有組織表達(dá)特異性，并且在消化道慢性炎癥及腫瘤發(fā)生發(fā)展等方面具有重要的生物學(xué)功能。TFF1具有黏膜保護和修復(fù)作用，但是近來的研究表明，TFF1與胃腸道的惡性腫瘤具有密切的關(guān)系，在癌灶組織中存在TFF1的表達(dá)降低，而在癌旁組織與炎癥部位呈高表達(dá)。microRNA家族已是基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中關(guān)鍵的一員，

2、同時它們影響著多條信號傳導(dǎo)通路。許多microRNA與胃癌密切相關(guān)，可以通過抑制癌基因的表達(dá)或負(fù)性調(diào)節(jié)抑癌基因從而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并且還可以直接以甲基化酶為靶蛋白通過影響甲基化水平參與下游基因的表達(dá)調(diào)控。新近研究表明三葉因子在正常組織與胃癌組織中差異表達(dá)，具有胃癌診斷的重要意義，是潛在的新型腫瘤標(biāo)志物。我們推測microRNA可以通過調(diào)控TFF1表達(dá)而參與胃癌發(fā)生發(fā)展調(diào)控。本課題擬檢測microRNA對TFF1表達(dá)的調(diào)控作用，并進(jìn)一

3、步闡明TFF1因子在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，確定以TFF1為靶點的microRNA寡核苷酸鏈為胃癌治療的新型藥物。
　　 本課題研究中，我們首先對調(diào)控TFF1表達(dá)的microRNA進(jìn)行篩選，我們應(yīng)用MiRWalk軟件及生物信息平臺有microRNA.org-Targets and Expression、TargetScan和PicTar，預(yù)測了分別結(jié)合在TFF1的5'UTR、3'UTR及CDS區(qū)域的microRNA信息。我們挑選了

4、可能結(jié)合在TFF1的3'UTR區(qū)域的miRNA-423-5p，應(yīng)用熒光定量PCR檢測它們在腫瘤組織和正常組織中的差異性表達(dá)，并檢測其對TFF1的mRNA表達(dá)影響。本課題我們重點研究miRNA-423-5p對TFF1的表達(dá)調(diào)控作用，我們構(gòu)建含TFF1的3'UTR區(qū)域的報告基因質(zhì)粒，應(yīng)用熒光素酶活性實驗檢測證實TFF1是miRNA-423-5p調(diào)控的靶基因，miRNA-423-5p負(fù)調(diào)控其基因表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-423-5p通