調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子-1α對缺氧胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、目的:構(gòu)建HIF-1a shRNA真核表達(dá)載體,研究缺氧誘導(dǎo)因子-1α與缺氧胃癌細(xì)胞侵襲的關(guān)系,探討其影響缺氧狀態(tài)下胃癌細(xì)胞侵襲能力的可能機(jī)制。
　　 方法:構(gòu)建HIF-1a shRNA真核表達(dá)載體傳染SGC-7901細(xì)胞,Western blot檢測HIF-1a RNA干擾效果,挑選最佳質(zhì)粒重新轉(zhuǎn)染并篩選出HIF-1a RNA干擾穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株。采用Western blot、MTT法、游走實驗及侵襲實驗觀察不同氧狀態(tài)與HIF-1a

2、 RNA干擾對HIF-1a表達(dá)的改變及胃癌細(xì)胞粘附、游走、侵襲能力的影響。采用Western blot檢測缺氧與HIF-1a RNA干擾對HIF-1a及胃癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子MMP-9和uPAR表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:HIF-1a shRNA真核表達(dá)載體構(gòu)建成功。缺氧狀態(tài)下HIF-1a的表達(dá)及人胃癌細(xì)胞系SGC-7901細(xì)胞的粘附、游走及侵襲能力均顯著增加；HIF-1a RNA干擾后HIF-1a的表達(dá)及人胃癌細(xì)胞系SGC-790