缺氧誘導(dǎo)因子-1對(duì)新生大鼠肺血管發(fā)育影響的研究.pdf

1、[目的]
　　本實(shí)驗(yàn)以新生SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，觀察腹腔注射DMOG（脯氨酰羥化酶抑制劑:二甲基乙二酰基甘氨酸）對(duì)新生大鼠肺組織HIF-1和VEGF表達(dá)的影響，觀察HIF-1對(duì)新生大鼠肺血管發(fā)育的影響，探討HIF-1對(duì)肺發(fā)育影響的機(jī)制。
　　[方法]
　　1.將自然分娩的73只新生SD大鼠通過(guò)抽簽法抽取64只，再將64只新生SD大鼠通過(guò)隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為兩組:實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組，每組各32只。實(shí)驗(yàn)組新生SD大鼠腹腔注射

2、DMOG（劑量:40mg·kg-1·d-1），正常對(duì)照組新生大鼠腹腔注射等體積生理鹽水。兩組于實(shí)驗(yàn)第4天、7天、10天和14天分別隨機(jī)抽取8只大鼠后處死。
　　2.對(duì)兩組大鼠肺組織進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變，并進(jìn)行放射性肺泡計(jì)數(shù)(RAC)。
　　3.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)兩組大鼠肺組織HIF-1α和VEGFmRNA表達(dá)水平。采用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blotting)方法檢測(cè)兩組大鼠肺組

3、織HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)水平。
　　4.所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　[結(jié)果]
　　1.肺組織形態(tài)學(xué)觀察:相同日齡，實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織RAC值均高于正常對(duì)照組大鼠，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。相同日齡，實(shí)驗(yàn)組大鼠肺間隔亦較正常對(duì)照組薄。相同日齡，實(shí)驗(yàn)組大鼠肺發(fā)育程度較正常對(duì)照組大鼠成熟。
　　2.大鼠肺組織HIF-1α mRNA和蛋白表達(dá)水平:相同日齡

4、，兩組大鼠肺組織HIF-1α mRNA相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，隨著日齡增大，兩組大鼠肺組織HIF-1αmRNA相對(duì)表達(dá)量整體均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。相同日齡，實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織HIF-1α表達(dá)量高于正常對(duì)照組大鼠，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），隨著日齡增大，兩組大鼠肺組織HIF-1α表達(dá)量整體均存在差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3.大鼠肺組織VEGF mRNA和蛋白表達(dá)水平:相同日齡，