缺氧誘導(dǎo)因子-1對幼鼠心肌保護(hù)作用的實驗研究.pdf

1、缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)是哺乳動物組織細(xì)胞在缺氧/缺血條件下產(chǎn)生的一種bHLH核轉(zhuǎn)錄因子,可以促進(jìn)其下游缺氧反應(yīng)基因(如VEGF、iNOS、EPO、GLUT1等)的表達(dá),增強組織細(xì)胞抵抗缺血缺氧的能力.HIF-1以異源二聚體形式存在,包括HIF-1α和HIF-1β兩個亞基,HIF-1α是HIF-1的活性亞基.而氯化鈷是HI F-1的活性誘導(dǎo)劑,可以誘導(dǎo)組織細(xì)胞內(nèi)HIF-1α聚集

2、,增強HIF-1的轉(zhuǎn)錄活性.該實驗應(yīng)用氯化鈷預(yù)處理幼鼠,研究心肌中HIF-1活性亞基HIF-1α及HIF-1靶基因產(chǎn)物iNOS和VEGF的表達(dá)規(guī)律,探討HIF-1對幼鼠心肌抗缺血缺氧能力的影響,并通過檢測氯化鈷預(yù)處理對幼鼠急性心肌梗死面積的影響,進(jìn)一步研究HIF-1對幼鼠心肌的保護(hù)作用.實驗1氯化鈷預(yù)處理對幼鼠心肌中HIF-1α的誘導(dǎo)作用及對iNOS、VEGF表達(dá)的影響目的 研究氯化鈷預(yù)處理對幼鼠心肌中HIF-1α的誘導(dǎo)作用及對iNOS

3、、VEGF表達(dá)的影響,探討HIF-1是否可能增強幼鼠心肌抵抗缺血缺氧的能力,對心肌產(chǎn)生保護(hù)作用.方法 健康雄性3周齡SD大鼠36只,體重40-60g,隨機平均分為六組:N<,0>組、N<,1>組、N<,3>組、N<,6>組、N<,12>組、N<,24>組.N<,0>組不做特殊處理,其余5組均給予腹腔注射0.6％氯化鈷溶液(6mg/100g).分別在給藥前、給藥后1h、3h、6h、12h和24h六個時間點順次處死N<,0>組、N<,1>組

4、、N<,3>組、N<,6>組、N<,12>組、N<,24>組實驗動物.免疫組化法檢測幼鼠心肌中HIF-1α、iNOS和VEGF的表達(dá),表達(dá)量以陽性染色面積百分比(病理圖文分析系統(tǒng)分析)表示.結(jié)論 (1)氯化鈷預(yù)處理可誘導(dǎo)幼鼠心肌中HIF-1α的表達(dá);(2)HIF-1α表達(dá)增加,增強了HIF-1的轉(zhuǎn)錄活性,從而促進(jìn)iNOS的表達(dá)和VEGF在預(yù)處理第二窗口期的高表達(dá);(3)HIF-1可能增強預(yù)處理第二窗口期幼鼠心肌抵抗缺血缺氧的能力,對心肌

5、產(chǎn)生保護(hù)作用.實驗2氯化鈷延遲預(yù)處理對幼鼠急性心肌梗死面積的影響目的 研究氯化鈷延遲預(yù)處理是否能減小幼鼠急性心肌梗死面積,探討HIF-1對幼鼠心肌的保護(hù)作用.方法 健康雄性3周齡SD大鼠18只,體重40-60g,隨機分為三組:假手術(shù)組(F組,n=6)、對照組(C組,n=6)和實驗組(H組,n=6).F組和C組給予腹腔注射蒸餾水(1m1/100g),H組給予腹腔注射0.6％CoCl<,2>溶液(6mg/100g).24小時后F組幼鼠在左冠