煙霧暴露肺動脈高壓模型大鼠肺組織缺氧誘導因子-1α及核因子-κB的表達變化.pdf

1、目的:
　　 通過研究香煙煙霧暴露致大鼠肺動脈高壓時大鼠肺組織中缺氧誘導因子(hypoxiainduciblefactor，HIF)-1α及核因子(nuclearfactor,NF)-κBp65的表達變化，來探討煙霧暴露致大鼠肺動脈高壓的可能發(fā)生機制。
　　 方法:
　　 健康雄性Wistar大鼠40只，隨機分為對照組、煙霧暴露4、8、12周組，每組10只。將煙霧暴露組大鼠置于自制的實驗性大鼠被動吸煙箱內(nèi)進行被動

2、吸煙，給予每次吸煙15支(每支香煙燃燒約10min，換煙時停止5min)，每天上、下午各1次，每周6天，分別香煙煙霧暴露4、8、12周，對照組除不香煙煙霧暴露外，其他條件完全相同。各組大鼠模型制備成功后，右心導管法測大鼠肺動脈平均壓(meanpulmonaryarterialpressure，mPAP)，無菌條件下完整游離心、肺組織，計算大鼠右心肥厚指數(shù)(rightventriclehypertrophyindex，RVHI)，取左肺組

3、織置于-80℃冰箱凍存，用熒光定量PCR測各組大鼠肺組織HIF-1αmRNA的相對表達量，取右肺組織常規(guī)石蠟包埋、切片，用于HE染色，免疫組織化學染色測大鼠肺組織中HIF-1α及NF-κBp65蛋白的表達，分析各指標的相關性。
　　 結(jié)果:
　　 ①煙霧暴露8周組大鼠及12周組大鼠mPAP(14.70±1.125，17.83±2.437)明顯高于4周組及對照組(11.88±1.536，10.67±1.125)，差異有統(tǒng)計

4、學意義（P均＜0.01）；煙霧暴露12周組(17.83±2.437)高于8周組(14.70±1.125)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）：煙霧暴露4周組與對照組組間差異無統(tǒng)計學意義(10.67±1.125、11.88±1.536)(P＞0.05)。②煙霧暴露12周組大鼠RVHl(0.26±0.006)高于對照組(0.22±0.020)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；對照組、煙霧暴露4周組及8周組各組組間差異均無統(tǒng)計學意義(0.22

5、±0.020、0.23±0.020、0.24±0.020)(P均＞0.05)。③煙霧暴露12周組大鼠肺組織中HIF-1αmRNA相對表達量(1.36±0.185)及8周組(1.17±0.211)明顯高于4周組(0.92±0.141)及對照組(0.76±0.137)，差異有統(tǒng)計學意義(P均＜0.01)；煙霧暴露12周(1.36±0.185)高于8周組(1.17±0.211)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；煙霧暴露4周組與對照組組間差異

6、無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。④煙霧暴露4、8、12周組大鼠肺血管平滑肌中HIF-1α蛋白(0.204±0.005、0.235±0.004、0.249±0.003)的表達明顯高于對照組(0.077±0.003)，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.01）：煙霧暴露12周組(0.690±0.003)及8周組(0.573±0.003)明顯高于4周組(0.478±0.003)，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.01）；煙霧暴露12周組(0.249±0.00

7、3)明顯高于8周組(0.235±0.004)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。⑤煙霧暴露4、8、12周組大鼠肺氣道上皮細胞NF-κBp65蛋白(0.478±0.003、0.573±0.003、0.690±0.003)的表達明顯高于對照組(0.308±0.005)，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.01）；煙霧暴露8、12周組(0.573±0.003、0.690±0.003)明顯高于4周組(0.478±0.003)，差異有統(tǒng)計學意義(P均＜0

8、.01)；煙霧暴露12周組(0.690±0.003)明顯高于8周組(0.573±0.003)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。⑥大鼠mPAP與RVHI呈正相關(r=0.478，P＜0.01);HIF-1α蛋白的表達與mPAP、RVHI、HIF-1αmRNA的相對表達量及NF-κBp65蛋白的表達均呈正相關(r=0.688、r=0.497、r=0.706、r=0.877,p均＜0.01).
　　 結(jié)論：
　　 香煙煙霧暴