Galectin-1基因高表達(dá)促進(jìn)胃癌細(xì)胞血管生成機(jī)制的研究.pdf

1、目的:Galectin-1是聚糖結(jié)合蛋白Galectin家族成員之一，與β．半乳糖苷具有高親和力，與受體結(jié)合啟動(dòng)了多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，參與細(xì)胞的黏附、增殖、凋亡和炎癥反應(yīng)等多種生理病理過(guò)程。Galectin-1在多種腫瘤組織的間質(zhì)細(xì)胞中高表達(dá)，能促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、增殖、促進(jìn)腫瘤免疫抑制和血管形成以及侵襲轉(zhuǎn)移等。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)，Galectin-1在胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer Associated Fibroblasts，CAFs)中高

2、表達(dá)，而Galectin-1和CAFs都與腫瘤細(xì)胞的血管生成密切相關(guān)，因此本研究的目的就是揭示起源于CAFs的Galectin-1高表達(dá)促進(jìn)胃癌細(xì)胞血管生成的內(nèi)在機(jī)制。
　　方法:收集2012年1月至2012年12月江蘇省蘇北人民醫(yī)院施行的全胃切除術(shù)47例胃癌組織和相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本(距切緣＞2cm)，根據(jù)分化程度將組織標(biāo)本分為正常胃組織，高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變胃組織，高分化、中分化和低分化胃癌組織，然后用免疫組織化學(xué)染色法研究不同分化

3、程度細(xì)胞中Galectin-1與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular Endothelial GrowthFactor，VEGF)以及血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(CD31)表達(dá)程度的關(guān)系。從胃癌組織中分離出CAFs，并用小分子干擾RNA敲除相應(yīng)基因，以抑制Galectin-1的表達(dá)，或者用重組質(zhì)粒的方法促進(jìn)其高表達(dá)，然后將處理后的CAFs與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)共培養(yǎng)，檢測(cè)小管形成能力;將CAFs與胃癌細(xì)胞共培養(yǎng)，檢測(cè)其VEGF和V

4、EGF受體(VEGFR-2)的表達(dá)情況。Galectin-1在活體的腫瘤血管生成中的作用，則用雞胚絨毛膜尿囊實(shí)驗(yàn)進(jìn)行研究。
　　結(jié)果:在不同分化程度的細(xì)胞中，分化程度越低，Galectin-1的表達(dá)越強(qiáng)烈，并且與Galectin-1與VEGF和CD31的表達(dá)呈正相關(guān)。而在共培養(yǎng)體系中，Galectin-1的高表達(dá)能促進(jìn)HUVEC的增殖、遷移和小管形成，并且能增強(qiáng)胃癌細(xì)胞VEGF的表達(dá)和VEGFR-2的磷酸化。雞胚絨毛膜尿囊實(shí)驗(yàn)也表