加蘭他敏的分離、烷基修飾及抑制乙酰膽堿酯酶構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一種進(jìn)行性的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，是最常見(jiàn)的老年癡呆癥。目前，阿爾茨海默病已成為影響老年人健康的主要疾病之一。在美國(guó)每年用于治療AD患者的藥物費(fèi)用和護(hù)理費(fèi)用是在癌癥和心臟病之后排在第三位花費(fèi)最大的疾病。目前最為成熟和成功治療該疾病的方法是采用膽堿酯酶抑制劑(acetylcholinesterase inhibitors，AChEIs)進(jìn)行治療，并且膽堿酯酶抑制劑是迄今為止唯一一

2、類(lèi)通過(guò)美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于治療AD的藥物。
　　 加蘭他敏是第二代AChE的抑制劑，是從石蒜屬植物石蒜鱗莖中分離純化而得的一種天然活性物質(zhì)。由于加蘭他敏在臨床上療效好且不良反應(yīng)輕，因此AD病患者對(duì)于該藥物的使用也相對(duì)較多。但目前加蘭他敏的提取率低、成本高，大大限制了加蘭他敏的使用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)研究了從石蒜鱗莖中分離純化加蘭他敏，并對(duì)其進(jìn)行烷基化修飾，研究了加蘭他敏及其同系物對(duì)AChE的抑制作用以及兩者之間的構(gòu)效關(guān)

3、系，以期獲得高效的乙酰膽堿酯酶抑制劑。本論文主要內(nèi)容如下：
　　 1.加蘭他敏提取
　　 通過(guò)對(duì)乙醇提取分離工藝的單因素試驗(yàn)，確定了乙醇的濃度、料液比、提取的溫度、提取時(shí)間作為正交試驗(yàn)各因素水平。由正交試驗(yàn)結(jié)果得出最佳的提取工藝分離如下：在料液比1:10，乙醇體積分?jǐn)?shù)95％，85℃下加熱回流提取2次，每次2h，提取率可達(dá)81.2％。
　　 2.加蘭他敏純化
　　 對(duì)加蘭他敏的分離純化采用兩種方法：一種是通

4、過(guò)乙酸乙酯在pH8.5萃取提取液，獲得加蘭他敏，萃取率為77％，純度為22.77％。另外一種是通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)在HPLC分析柱上分析出流動(dòng)相，摸索出可以用來(lái)分離加蘭他敏的流動(dòng)相，再通過(guò)HPLC制備柱制備加蘭他敏，制備率為50.8％，純度為92.52％。
　　 3.加蘭他敏N-末端烷基化修飾
　　 研究了不同反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)物比例對(duì)N-烷基加蘭他同系物產(chǎn)率的影響影響。通過(guò)實(shí)驗(yàn)分析得出：加蘭他敏同系物在反應(yīng)物比例為加蘭他敏：溴代烷烴

5、=1:5時(shí)，反應(yīng)時(shí)間為36小時(shí)，產(chǎn)物的生成率最高。最后通過(guò)元素分析、UV、IR、1H NMR、13C NMR等方法確認(rèn)了化合物的合成。
　　 4.加蘭他敏及其同系物對(duì)AChE抑制作用
　　 通過(guò)測(cè)定加蘭他敏及其同系物對(duì)AChE的抑制作用和運(yùn)用軟件完成加蘭他敏同系物與AChE分子對(duì)接結(jié)果顯示，當(dāng)對(duì)加蘭他敏N-末端進(jìn)行烷基修飾后，加蘭他敏同系物對(duì)AChE的抑制作用明顯增強(qiáng)。當(dāng)烷基鏈碳原子數(shù)小于12時(shí)，加蘭他敏同系物對(duì)AChE