左旋-肉毒堿對糖皮質激素誘導的骨丟失模型大鼠骨密度和骨微結構的影響.pdf

1、目的：左旋-肉毒堿（L-carnitine，LC）是一種必需營養(yǎng)素，其主要生理作用是調節(jié)細胞能量的產生。本實驗通過LC干預小鼠成骨細胞系MC3T3-E1，探討LC對無血清及糖皮質激素（GC）誘導的MC3T3-E1凋亡的影響；以GC干預制備骨丟失大鼠模型，同時補充LC，觀察LC對骨丟失模型大鼠的骨密度（BMD）和骨微結構的影響。 方法：（1）以MC3T3-E1為研究對象，以10-5至10-2M LC干預MC3T3-E1。細胞凋亡E

2、LISA試劑盒檢測細胞凋亡。觀察GC誘導的MC3T3-E1凋亡時以10-6M地塞米松（Dex）誘導。Western blot分析法檢測Bcl-2、Bax和cytochrome c蛋白質水平。酶底物法測定caspase-3和caspase-9活性。 （2）以21只7月齡雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠為研究對象，隨機分為對照組（7只）、激素造模組（GCT組）（7只）和LC干預組（LC組）（7只）。GCT組和LC組給予腹

3、腔注射甲基潑尼松龍3.5mg/kg/d，對照組給予腹腔注射等量蒸餾水。此外，LC組每日飲水中添加LC300mg/kg。12周后結束實驗，取骨組織以雙能X線吸收法（DXA）測定大鼠腰椎（L3-L5）和左側股骨總BMD和總骨礦物質含量（BMC）。顯微CT（μCT）測量大鼠左側脛骨松質骨微結構參數。 結果：（1）10-4至10-2M LC抑制MC3T3-E1細胞凋亡；10-4至10-2M LC降低無血清誘導的MC3T3-E1細胞cyt

4、ochrome c釋放和caspase-3，caspase-9活性；10-4至10-2M LC抑制Dex誘導的MC3T3-E1細胞凋亡。 （2）GCT組體重較對照組降低，LC組體重較GCT組增加，但低于對照組，無顯著差異。 GCT組左側股骨和腰椎（L3-L5）的離體BMD和BMC較對照組均顯著降低（P<0.05）。LC組左側股骨BMC、腰椎（L3-L5）BMD顯著高于GCT組（P<0.05）。 GCT組左側脛

5、骨骨小梁數量（Tb.N）、骨體積分數（BVF）、體積骨密度（vBMD）和骨小梁聯接密度（Conn.D）與對照組相比均顯著降低，骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁間隔（Tb.Sp）顯著增高（P均<0.01），結構模型指數（SMI）增高不明顯。LC組Tb.N、BVF和Conn.D較GCT組顯著增高（P均<0.01），Tb.Th（P<0.05）、Tb.Sp（P<0.01）顯著降低。 結論：（1）LC通過抑制cytochrome c釋放和