血管外支架預防豬大隱靜脈橋再狹窄的實驗研究.pdf

1、動脈粥樣硬化是當今世界威脅人類健康、導致人群發(fā)病和死亡的主要疾病之。冠狀動脈旁路移植手術(shù)(coronary artery bypass grafting，CABG)是晚期冠心病患者主要的治療方法，自體大隱靜脈仍然是必需的、最常用的移植血管材料。然而，移植靜脈血管進行性的內(nèi)膜與中膜增厚，以及在此基礎(chǔ)上形成的粥樣硬化，靜脈橋的10年阻塞率達到50％。 使用各種抗血小板藥物、血管舒張藥物的應(yīng)用、避免在外科準備和移植手術(shù)過程中對靜脈橋

2、血管壁的損傷等，可以減少臨床和實驗研究中的靜脈橋的早期血栓阻塞和狹窄，然而所有這些措施都不能完全根除靜脈橋血管的內(nèi)、中膜增厚。 動物實驗和臨床研究表明：承受動脈壓力后靜脈橋血管的過度擴張而引起的管壁損傷是促進靜脈橋內(nèi)膜增生與粥樣硬化的首要原因，在橋血管周圍放置血管外支架可以防止靜脈橋的過度擴張，可能提高靜脈橋的遠期通暢率。 本研究在分別建立更能模擬人CABG術(shù)后大隱靜脈橋病理學變化的豬大隱靜脈一頸總動脈間置(端端吻合)動

3、物模型以及大隱靜脈一頸總動脈旁路移植(端側(cè)吻合)動物模型的基礎(chǔ)上，用多孔的滌綸材料制作非限制性的血管外支架，觀察血管外支架支持對靜脈橋血管壁及吻合口內(nèi)、中膜增生的影響，進一步探討血管外支架預防靜脈橋再狹窄的機制，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。第一部分端端吻合研究血管外支架預防靜脈橋再狹窄目的：擬用多孔的滌綸材料制作非限制性的血管外支架，以豬大隱靜脈一頸總動脈間置(端端吻合)靜脈橋為模型，觀察血管外支架支持對靜脈橋血管內(nèi)、中膜增生的影響。

4、 方法：20-25Kg普通長白豬8只，常規(guī)術(shù)前用藥、麻醉、術(shù)中抗凝等，后腿外側(cè)縱切口，“no-touch”技術(shù)剝?nèi)〈箅[靜脈長度約10cm，頸部正中切口，于氣管食管溝內(nèi)解剖出頸總動脈，預留動脈段約4cm，動脈套帶阻斷其兩端，切除頸總動脈長約3cm，斷端斜剪為45度，大隱靜脈兩端同樣剪為45度，倒轉(zhuǎn)，與頸總動脈進行端端吻合。吻合方式：8-0 polyprolene縫線連續(xù)縫合，先吻合近心端吻合口，遠心端吻合口完成前開放近端動脈套帶，排出

5、氣體，完畢后開放遠端動脈套帶。靜脈橋充盈，觸之有搏動。采用隨機的方法決定一側(cè)靜脈橋作為實驗組，另一側(cè)靜脈橋作為對照組，實驗組靜脈橋放置滌綸外支架：縱向剪開外支架(9mm滌綸人造血管)，包裹實驗側(cè)靜脈橋，3-0絲線間斷縫合，外支架比橋血管稍長，直徑6-8mm，不限制靜脈橋的最初擴張。術(shù)后常規(guī)飲食，飲食中加入腸溶阿司匹林150mg／天。術(shù)后28天，經(jīng)原頸部切口于氣管食管溝內(nèi)找到靜脈橋，檢查靜脈橋是否通暢，完整取下靜脈橋，10％中性甲醛固定，

6、常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片厚度5um，用組織學和免疫組化方法進行檢測。結(jié)果：術(shù)后28天所有的靜脈橋血管都保持通暢。與對照組相比，實驗組靜脈橋血管內(nèi)、中膜增生明顯減輕。內(nèi)膜厚度對照組和實驗組分別為0.4209±0.0876mm和0.1346±0.0415mm，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)：中膜厚度對照組和實驗組分別為0.4528±0.0687mm和0.254±0.01532mm，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。與此相對應(yīng)，內(nèi)膜

7、面積對照組和實驗組分別為3.7099±0.5103 mm<'2>和1.4071±0.334，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)：中膜面積對照組和實驗組分別為5.3233±1.1569mm<'2>和3.009l±0.1454 mm<'2>，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。實驗組管腔面積大于對照組，兩組分別為5.5043±1.9866 mm<'2>和7.9904±1.5915mm<'2>，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。與對照

8、組相比，實驗組內(nèi)膜及中膜內(nèi)側(cè)區(qū)域增殖細胞核抗原(PCNA)、血小板源性生長因子(PDGF)陽性細胞顯著減少，PCNA對照組和實驗組分別為12.9％±2.32％和2.43％±0.65％，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)；PDGF對照組和實驗組分別為12.97％±1.54％和2.46％±0.25％，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。實驗組外膜與中膜交界處可見較多新生微血管。 結(jié)論：l、靜脈橋血管滋養(yǎng)血管崩解與靜脈橋血管新內(nèi)

9、膜及中膜增生密切相關(guān)；2、非限制性滌綸血管外支架可以促進橋血管外膜微血管生成(血管滋養(yǎng)血管)；3、非限制性滌綸血管外支架可以顯著抑制大隱靜脈橋(端端吻合)橋血管新內(nèi)膜及中膜增生，可能預防大隱靜脈橋的再狹窄。 目的：擬用多孔的滌綸材料制作非限制性的血管外支架，以豬大隱靜脈一頸總動脈旁路移植(端側(cè)吻合)靜脈橋為模型，觀察血管外支架支持對靜脈橋血管壁及吻合口內(nèi)、中膜增生的影響。 方法：25-30Kg普通長白豬8只，建立雙側(cè)豬大

10、隱靜脈一頸總動脈旁路移植(端側(cè)吻合)動物模型，“no-touch”技術(shù)剝?nèi)∝i大隱靜脈長度約locm，豬頸部正中切口，暴露雙側(cè)頸總動脈，每次阻斷‘側(cè)頸總動脈，移植大隱靜脈，頸總動脈與倒置的、修剪為45度大隱靜脈進行端側(cè)吻合，用8-0 polyprolene縫線連續(xù)縫合，先進行近端吻合，吻合口全部完成、排氣、頸動脈開放后，在兩吻合口之間結(jié)扎并切斷頸總動脈，調(diào)整靜脈橋血管張力及形狀，縱向剪開外支架(9mm滌綸人造血管)，塑形，包裹實驗側(cè)靜脈橋

11、，3-0絲線間斷縫合，外支架比橋血管稍長，直徑6-8m，不限制靜脈橋的最初擴張，兩端用3-0絲線固定于頸總動脈外膜上，完全覆蓋而不壓迫吻合口。采用隨機的方法決定每一只豬的一側(cè)靜脈橋外放置外支架作為實驗組，另一側(cè)不放外支架作為對照組，隨機決定遠心段或近心段大隱靜脈用于實驗組。術(shù)后常規(guī)飲食，飲食中加入腸溶阿司匹林150mg／天。術(shù)后35天，經(jīng)原頸部切El于氣管食管溝內(nèi)找到靜脈橋，檢查靜脈橋是否通暢，完整取下靜脈橋，10％中性甲醛固定，常規(guī)脫

12、水，石蠟包埋，切片厚度5 um，用組織學和免疫組化方法對靜脈橋血管壁及吻合口進行檢測。 結(jié)果：術(shù)后35天，所有的靜脈橋血管都保持通暢。與對照組相比，實驗組靜脈橋血管內(nèi)、中膜增生明顯減輕。內(nèi)膜厚度對照組和實驗組分別為0.4988±0.0722mm和0.243±0.0602mm，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)；中膜厚度對照組和實驗組分別為0.6288±0.095ram和0.4195±0.0673mmTl，兩組比較有顯著性差異

13、(P<0.01)。與此相對應(yīng)，內(nèi)膜面積對照組和實驗組分別為4.6051±1.4096 mm<'2>和2.2222±0.5453 mm<'3>，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)；中膜面積對照組和實驗組分別為7.7914±2.0923 mm<'2>和5.7927±1.3805 mm<'2>,兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。實驗組管腔面積大于對照組，兩組分別為5.1378±1.5094 mm<'2>和7.5876±2.2119mm<

14、'2>，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。與對照組相比，實驗組近、遠端吻合口內(nèi)、中膜增生明顯減輕。近端吻合口內(nèi)膜厚度對照組和實驗組分別為0.6992±0.0966mm和0.3754±0.0665mm，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)；中膜厚度對照組和實驗組分別為0.8307±0.1404mm和0.6444±0.0602mm，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)；遠端吻合口內(nèi)膜厚度對照組和實驗組分別為0.6202±0.1535mm

15、和0.4119±0.1084mm，兩組比較有顯著性差異(P<0.05)；中膜厚度對照組和實驗組分別為0.8222±0.1507mm和0.5794±0.1638mm，(P<0.05)。近、遠端吻合口之間的差異無統(tǒng)計學意義。與對照組相比，實驗組內(nèi)膜及中膜內(nèi)側(cè)區(qū)域PCNA、PDGF陽性細胞顯著減少，PCNA對照組和實驗組分別為7.54％±4.21％和3.45％10.9％，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)：PDGF對照組和實驗組分別為8.4

16、4％±6.04％和2.67％±1.01％，兩組比較有顯著性差異(P<0.05)。而實驗組外膜PCNA、PDGF陽性細胞豐富：PCNA對照組和實驗組分別為4.62％±1.62％和 12.62％±4.2％，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)，PDGF對照組和實驗組分別為3.96％±2.88％和13.29％±6.05％，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)。實驗組外膜與中膜交界處可見較多新生微血管。結(jié)論：l、靜脈橋血管滋養(yǎng)血管崩解與靜脈橋血