心血瘀阻證心肌血管新生及其養(yǎng)心通脈有效部位方干預效應的研究.pdf

1、目的：研究中醫(yī)絡病學及血管新生的相關性，從絡病學理論角度闡述心血瘀阻證的病理基礎。
　　 方法：運用文獻研究，主要參考CNKI 數(shù)據(jù)庫、VIP 數(shù)據(jù)庫中收錄的與絡病理論相關文獻、血管新生相關文獻。
　　 結果：
　　 1.通過研究表明中醫(yī)的絡病理論在運用于冠心病時與血管新生具有相關性，主要體現(xiàn)在絡脈系統(tǒng)與現(xiàn)代的血管神經(jīng)、神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡、血管內(nèi)皮損傷具有推論上的相關性。
　　 2.心血瘀阻證的絡病學

2、基礎為主要表現(xiàn)為心絡瘀阻、心絡絀急和絡虛不榮三個方面。
　　 第二部分:抗心血瘀阻證的有效成分部位方的研究實驗1：養(yǎng)心通脈方起主要作用有效成分部位抗心肌缺血的研究
　　 目的：尋找養(yǎng)心通脈方中起主要作用的有效部位。
　　 方法：取wistat 雄性大鼠120 只，隨機分為12 組，每組10 只，包括人參皂苷組、人參多糖組、丹參酮ⅡA 組、丹參菲醌組、復方苷元組、復方苷類、復方蛋白組、總多糖組、總生物堿組、總揮發(fā)油

3、組、空白模型組和健康對照組。其中10 個有效部位組均在喂飼標準飼料同時，灌服相應的有效部位口服液，每次4 毫升；健康對照組給于灌服等量的生理鹽水。每天1 次，連續(xù)10天，于第11 天開始試驗。每例大鼠在麻醉后均作Ⅱ導聯(lián)心電圖1 次，隨后按上述方法造模，記錄觀察注射垂體后葉素后15s、30s、120s、300s、600s 的心電圖；頸動脈插管取血做血液流變學指標。
　　 結論：養(yǎng)心通脈方中提取分離出10 種有效部位群，其中人參皂苷

4、、丹參酮ⅡA、總生物堿、人參多糖、總揮發(fā)油，5 種成分具有顯著的抗心肌缺血作用，故作為養(yǎng)心通脈方起主要作用的有效成分部位，而將復方多糖與丹參菲醌作為次要有效成分部位。復方苷類、復方苷元、復方蛋白3 種成分部位因其沒有抗心肌缺血（心血瘀阻證）的作用，且對血流變學也無改善作用，故將其列為養(yǎng)心通脈方無效成分剔出。
　　 實驗2：養(yǎng)心通脈方主要與次要有效成分部位交互作用抗心肌缺血研究目的：明確5 個主要成分部位與2 個次要成分之間是否有

5、交互作用方法：按L4（23）正交設計安排實驗，將人參皂苷、丹參酮ⅡA、總生物堿、人參多糖、總揮發(fā)油做為基礎因子，復方多糖與丹參菲醌作為考察因子。
　　 將wistar 雄性大鼠40 只，隨機分為5 組，每組8 只，包括處方1 組、處方2組、處方3、處方4 組，模型組。各組均在喂飼標準飼料同時，灌服相應的有效部位口服液，每次4 毫升；每天1 次，連續(xù)10 天，于第11 天開始試驗。
　　 每列大鼠在麻醉后均作Ⅱ導聯(lián)心電圖1

6、 次，隨后按上述方法造模，記錄觀察注射垂體后葉素后15s、30s、120s、300s、600s 的心電圖；頸動脈插管取血做血液流變學指標。
　　 結論：養(yǎng)心通脈方主要與次要有效成分部位無交互作用。
　　 實驗3：養(yǎng)心通脈方各有效成分部位的有效劑量配伍抗心血瘀阻證研究目的：探討?zhàn)B心通脈方有效部位配伍的最佳劑量方法：取wistar 雄性大鼠72 只，隨機分為9 組，每組8 只，按L9（34）正交表設計安排試驗，每個因子取3

7、個水平。9 組均在喂飼標準飼料同時，灌服相應的有效部位口服液，每次4 毫升；每天1 次，連續(xù)10 天，于第11 天開始試驗。每例大鼠在麻醉后均作Ⅱ導聯(lián)心電圖1 次，隨后按上述方法造模，記錄觀察注射垂體后葉素后15s、30s、120s、300s、600s 的心電圖。
　　 結果及結論：采用直觀分析法分析結果，5 種有效部位的最佳配伍為：人參皂苷34.33g 生藥／kgw，丹參酮ⅡA 1.27g 生藥/kgw、人參多糖4.77g 生

8、藥/kgw、總生物堿取0.67g 生藥/kgw、總揮發(fā)油62.2ml 生藥/kgw。
　　 第三部分:養(yǎng)心通脈有效部位方促心血瘀阻證心肌血管新生的研究
　　 實驗1：養(yǎng)心通脈有效部位方對心血瘀阻證大鼠血管生長因子VEGF 及bFGF 影響的研究目的：探討?zhàn)B心通脈有效部位方治療心血瘀阻證的機理方法：將結扎大鼠冠狀動脈左前降支復制心血瘀阻證大鼠模型成功后的24 只大鼠隨機分為模型組、YTⅠ治療組、YTⅡ治療組，SXBXW 治

9、療組，再與6只假手術組、6 只正常組，一共組成6 組；各組均在喂飼標準飼料同時，灌服相應處方口服液，每次4 毫升，健康對照組、模型組灌服等量的生理鹽水。
　　 每天1 次，連續(xù)2 周，于第15 天，處死動物取材。用免疫組織化學法檢測CD34、VEGF、bFGF 表達。
　　 結論：促進VEGFmRNA、bFGFmRNA 上調(diào),使VEGF、bFGF 的合成分泌增加，引起缺血區(qū)血管新生，從而側支循環(huán)的良好建立可能是養(yǎng)心通脈有

10、效成分部位方治療心血瘀阻證的重要機制。
　　 實驗2：養(yǎng)心通脈有效部位方對心血瘀阻證大鼠血管生長因子基因表達量影響的研究目的：探討?zhàn)B心通脈有效部位方治療心血瘀阻證的機理方法：將結扎大鼠冠狀動脈左前降支復制心血瘀阻證大鼠模型成功后的24 只大鼠隨機分為模型組、YTⅠ治療組、YTⅡ治療組，SXBXW 治療組，再與6只假手術組、6 只正常組，一共組成6 組；各組均在喂飼標準飼料同時，灌服相應處方口服液，每次4 毫升，健康對照組、模型組

11、灌服等量的生理鹽水。
　　 每天1 次，連續(xù)2 周，于第15 天，處死動物取材。用免疫組織化學法檢測CD34、VEGF、bFGF 表達；
　　 結論：促進VEGFmRNA、bFGFmRNA 上調(diào)，促進VEGF、bFGF 的合成分泌增加，引起缺血區(qū)血管新生，從而側支循環(huán)的良好建立可能是養(yǎng)心通脈有效成分部位方治療心血瘀阻證的重要機制。
　　 實驗3 ：養(yǎng)心通脈有效部位方對心血瘀阻證大鼠冠狀微循環(huán)及相關因子影響的研究目

12、的：探討?zhàn)B心通脈有效部位方治療心血瘀阻證的機理方法：取上述wistar 雄性大鼠128 只，隨機分為4 組：養(yǎng)心通脈有效部位方組（養(yǎng)通Ⅱ組）、復方丹參注射液組（丹參組）、空白模型組（模型組）、假手術組。結扎大鼠冠狀動脈左前降支復制心血瘀阻證大鼠模型10 分鐘后經(jīng)頸外靜脈注入給藥，養(yǎng)心通脈有效部位方組按0.5ml/100g 體重給予YTⅡ注射液、復方丹參注射液組按0.5ml/100g 體重給予復方丹參注射液，空白模型組按0.5ml/100

13、g 體重給予生理鹽水，假手術組按0.5ml/100g 體重給予生理鹽水。用藥15 分鐘后，采用墨汁灌注法進行冠狀微循環(huán)形態(tài)觀察，采用熒光造影法進行冠狀微循環(huán)活體觀察，采頸動脈血用生化檢測法，按不同試劑盒操作要求分別檢測心肌組織丙二醛（MDA）含量、心肌及血清酶學指標、血管內(nèi)皮功能指標。
　　 結論：養(yǎng)心通脈有效部位方注射液促進心血瘀阻部位的血管新生，改善冠狀微循環(huán)與抗氧自由基生成、減輕鈣超載和調(diào)整血管內(nèi)皮細胞功能等多種機制有關。