瘦素、食欲素-A在肝、腸損傷介導的內環(huán)境紊亂中的變化及對臟器功能的影響.pdf

1、瘦素(Leptin)是一種主要作用為抑制攝食、促進能量消耗的活性因子，食欲素-A(Orexin-A)是一種主要作用為促進攝食、抑制能量消耗的短肽。目前研究發(fā)現(xiàn)Leptin可通過腺苷酸活化蛋白激酶、過氧化物酶體增殖物激活受體-α等途徑抑制糖原合成、促進脂肪酸氧化，Orexin-A在能量代謝中的作用及其在一定條件下的表達水平都與Leptin相反，而且它們與糖皮質激素、交感神經(jīng)興奮性、炎癥介質都存在聯(lián)系，提示它們可能參與調控創(chuàng)傷、炎癥、感染后

2、的內環(huán)境紊亂。由于肝臟、腸道是營養(yǎng)吸收、能量代謝的重要器官，本文考察了Leptin、Orexin-A的表達水平在肝、腸損傷時發(fā)生的變化，分析了這些變化與重要臟器的結構損傷、功能改變之間的聯(lián)系，并探討了創(chuàng)傷后營養(yǎng)支持、激素干預對它們的表達水平和臟器功能的影響。 1.肝缺血/再灌注損傷后Leptin、Orexin-A表達水平的變化及與臟器功能的聯(lián)系 建立大鼠70％肝缺血/再灌注損傷模型，設立假手術、缺血60min后不同時間的

3、再灌注組。采用放免法檢測Leptin、Orexin-A在外周血、各自的核心分泌器官(脂肪、下丘腦)的蛋白水平；采用蘇木素-伊紅染色考察與自由基損傷、能量代謝密切相關的外周臟器(肺、肝)的損傷情況，以試劑盒檢測血清髓過氧化物酶、丙氨酸氨基轉移酶作為肺、肝功能指標，以血清總抗氧化能力、葡萄糖作為抗自由基損傷、能量儲備的代謝指標；采用免疫組化檢測Leptin、Orexin-A在肺、肝的蛋白表達；采用逆轉錄-聚合酶鏈式反應檢測Leptin、Or

4、exin-A及其受體在下丘腦、脂肪、肺、肝的mRNA表達。從縱向時序變化的角度考察它們的表達改變與臟器功能的聯(lián)系。 結果顯示，血清Leptin、總抗氧化能力和葡萄糖于再灌注后期顯著升高，脂肪Leptin蛋白水平在再灌注早期顯著升高，血漿、下丘腦Orexin-A蛋白水平無顯著變化。再灌注后期肺、肝損傷情況及其功能指標顯著改善。肺Leptin、Orexin-A蛋白表達顯著降低，肝Leptin蛋白表達于再灌注早期、后期顯著升高，而肝O

5、rexin-A蛋白表達變化與之相反。各臟器Leptin、Orexin-A mRNA表達的變化趨勢非常相似，其受體mRNA表達緊隨它們而變化。 2.營養(yǎng)支持、激素干預對膿毒癥時Leptin、Orexin-A表達水平及臟器功能的影響 第一部分的實驗結果提示Leptin、Orexin-A的表達水平受能量代謝的調控，與下丘腦-脂肪-肺/肝這條功能主線存在顯著聯(lián)系。由于脂肪乳、胰島素、雌二醇與能量代謝、創(chuàng)傷修復都存在聯(lián)系，我們設想

6、利用它們來干預創(chuàng)傷后的脂肪酸代謝、糖代謝和激素分泌，可能會對Leptin、Orexin-A的表達水平及臟器功能產(chǎn)生影響。建立大鼠盲腸結扎穿孔(CLP)致膿毒癥模型，設立假手術、CLP模型和三個藥物干預組。檢測CLP后12h時Leptin、orexin-A在外周血、肺、肝的蛋白表達與它們在下丘腦、脂肪、肺、肝的mRNA表達，考察肺、肝的損傷情況以及臟器功能、代謝指標的變化。從橫向干預差異的角度考察它們的表達改變與臟器功能的聯(lián)系。

7、結果顯示，各組血清Leptin、總抗氧化能力、葡萄糖無顯著變化，CLP模型、CLP+脂肪乳的血漿Oreyin-A顯著升高。CLP模型、CLP+胰島素的血清髓過氧化物酶顯著升高，CLP+胰島素的血清丙氨酸氨基轉移酶顯著降低。CLP模型、CLP+雌二醇的肺、肝損傷較明顯，CLP+脂肪乳、CLP+胰島素顯著改善。各組肺、肝Leptin、Orexin-A蛋白表達和各臟器Leptin、Orexin-AmRNA表達的變化不一。CLP+脂肪乳的下丘腦

8、、脂肪Leptin mRNA表達顯著升高，肺、肝Leptin mRNA表達與蛋白表達均顯著降低。 上述兩部分的實驗結果顯示：Leptin、Orexin-A在肝、腸損傷介導的內環(huán)境紊亂中發(fā)生不同程度的變化，與重要臟器的結構損傷、功能改變聯(lián)系密切。脂肪乳、胰島素顯著減輕肺、肝損傷，而雌二醇無明顯的改善作用。雖然三種干預藥物對Leptin、Orexin-A的表達水平具有不同的影響，但卻提示了Leptin、Orexin-A參與三種干預藥