化濁疏肝法對肝胃不和型功能性消化不良大鼠食量、瘦素及食欲素等影響的研究.pdf

1、目的：觀察化濁疏肝法對激怒所致肝胃不和型功能性消化不良大鼠食量變化及瘦素、食欲素等分泌的影響，探討肝胃不和型功能性消化不良的神經(jīng)生化基礎(chǔ)。揭示功能性消化不良治療中化濁疏肝對食欲影響的可能機制。
　　 方法：清潔級雄性Wistar大鼠64只，體重200-240g，由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，首先隨機將實驗大鼠分為3組，即造模檢驗對照組（n=5）、造模檢驗刺激組(n=5)、和正式實驗組（n=54）。將正式實驗組大鼠采用隨機區(qū)組設(shè)

2、計分為正常組(A)、刺激激怒對照組(B)、中藥治療低劑量組(C)、中藥治療中劑量組(D)、中藥治療高劑量組(E)和西藥治療組(F)6組，每組9只大鼠。每日測量每組大鼠日均食量，自由飲食和飲水，鼠糧由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。采用長海綿鉗夾大鼠尾遠(yuǎn)端令其與其它大鼠撕打的方法建立動物模型，除正常組和造模檢驗對照組外，其他各組大鼠每日均接受造模刺激。連續(xù)造模7天后。對造模檢驗對照組和造模檢驗刺激組大鼠連續(xù)禁食12小時后進(jìn)行模型檢驗，通過對

3、大鼠行為和飲食觀察及血清瘦素水平的檢測檢驗動物模型是否造模成功，行為上刺激組大鼠出現(xiàn)明顯進(jìn)食減少，體重減輕，情緒上表現(xiàn)出困倦狀態(tài)，毛皮發(fā)暗并伴有枯黃樣變，大鼠斷頭取血后，對離心血清采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行血清瘦素水平測定，對飲食、體重及瘦素水平數(shù)據(jù)進(jìn)行兩樣本間t檢驗，顯示差別有統(tǒng)計學(xué)意義，提示造模成功。之后停止對各組大鼠的刺激，正常組和刺激激怒對照組大鼠每日給予2ml蒸餾水灌胃，中藥治療低劑量組每天給予0.5ml濃縮中藥加1.5ml蒸餾水

4、的中藥灌胃治療，中藥治療中劑量組每天給予1ml濃縮中藥加1ml蒸餾水的中藥灌胃治療，中藥治療高劑量組每天給予2ml濃縮中藥灌胃治療，西藥治療組每天給予嗎丁啉溶液2ml灌胃治療，濃縮中藥為自擬化濁疏肝方原液濃縮為1/10所獲得的濃縮液，由河北省中醫(yī)藥研究院煎制。連續(xù)治療7天后對所有大鼠禁食禁水12小時后斷頭處死，處死20分鐘前對每只大鼠均用墨汁1ml灌胃，斷頭后快速留取血標(biāo)本并在冰盒上分離出下丘腦，破腹后取出全小腸根據(jù)墨汁長度測量小腸推進(jìn)

5、率，采取酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行血清瘦素水平測定，采用放射免疫法對血漿及下丘腦組織中的食欲素A進(jìn)行測定。根據(jù)所有組的檢測結(jié)果觀察，探討肝胃不和型功能性消化不良的神經(jīng)生化基礎(chǔ)。揭示功能性消化不良治療中化濁疏肝對食欲影響的可能機制。
　　 結(jié)果：1食量變化（圖1）：正常組食量比較穩(wěn)定；造模期刺激激怒對照組及中西藥物治療各組大鼠食量迅速減少，下降趨勢明顯；治療期刺激激怒對照組大鼠食量繼續(xù)保持低食欲狀態(tài)，食量恢復(fù)不明顯，中藥治療低劑量組大鼠食

6、量恢復(fù)趨勢相比刺激激怒對照組略好，但日均食量仍遠(yuǎn)低于其它各組大鼠，中藥治療中劑量組大鼠食量逐步穩(wěn)定回升，到治療期結(jié)束已基本恢復(fù)到接近正常組大鼠日均食量水平，中藥治療高劑量組大鼠食量回升趨勢明顯，治療后期食量甚至已經(jīng)超過正常組大鼠日均食量，西藥治療組大鼠食量恢復(fù)趨勢與中藥治療高劑量組基本相同。
　　 2小腸推進(jìn)率（表1）：各組大鼠小腸墨汁推進(jìn)率對比有顯著性差異(P＜0.001)。兩兩比較結(jié)果顯示正常組與中藥治療高劑量組之間大鼠小腸

7、墨汁推進(jìn)率無顯著性差異(P＞0.05)，其他各組間大鼠小腸墨汁推進(jìn)率均有顯著性差異(P＜0.05)，從均數(shù)看刺激激怒對照組(46.44±2.74％)略低與中藥治療低劑量組(52±3.43％)，中藥治療低劑量組明顯低于中藥治療中劑量組(63.33±3.16％)，中藥治療高劑量組(71.44±3.09％)高于前面三組接近正常組(72.67±2.69％)水平，西藥治療組(76.44±2.51％)在大鼠小腸墨汁推進(jìn)率上明顯高于其他各組。

8、　　 3體重變化（表2）：初始分組后：各組大鼠之間的體重?zé)o顯著性差異(P＞0.05)。造模成功后：各組大鼠體重對比有顯著性差異(P＜0.01)，兩兩比較結(jié)果顯示正常組(A)與其他各組大鼠體重均有顯著性差異(P＜0.001)，除正常組外其它各組間大鼠體重均無顯著性差異(P＞0.05)，從均數(shù)看接受刺激的各組大鼠體重明顯低于正常組(223.33±8.82g)。治療后：各組大鼠體重對比有顯著性差異(P＜0.01)，兩兩比較結(jié)果顯示中藥治療中

9、劑量組(D)和西藥治療組(F)之間大鼠體重?zé)o顯著性差異(P＞0.05)，A組與中藥治療高劑量組(E)相比0.01＜P＜0.05，刺激激怒對照組(B)、中藥治療低劑量組(C)和A組、D組、E組、F組之間大鼠體重有顯著性差異(P＜0.001)，從均數(shù)看A組(222.78±8.51g)、E組(219.56±7.13g)大鼠體重高于D組(207.44±10.08g)、F組(208.33±7.21g)大鼠體重，并明顯高于B組(190.44±9.5

10、8g)和C組(197.44±8.82g)大鼠體重。
　　 4血清瘦素水平（表3）：各組大鼠血清瘦素水平對比有顯著性差異(P＜0.001)。兩兩比較結(jié)果顯示刺激激怒對照組(B)和中藥治療低劑量組(C)之間大鼠血清瘦素水平無顯著性差異(P＞0.05)，正常組(A)、中藥治療中劑量組(D)、西藥治療組(F)各組之間大鼠血清瘦素水平無顯著性差異(P＞0.05)，D組、中藥治療高劑量組(E)、F組各組之間大鼠血清瘦素水平無顯著性差異(P＞

11、0.05)，其他各組間大鼠血清瘦素水平均有顯著性差異(P＜0.05)，從均數(shù)看B組（15.73±2.48ng/ml）和C組（14.00±1.73ng/ml）大鼠血清瘦素水平明顯高于其他四組，D組(11.00±2.15ng/ml)、E組(10.05±1.33ng/ml)和F組(10.93±1.61ng/ml)大鼠血清瘦素水平均已接近于正常組(12.38±1.60ng/ml)水平。
　　 5血漿食欲素A水平（表4）：各組大鼠血漿食欲

12、素A水平對比有顯著性差異(P＜0.001)。兩兩比較結(jié)果顯示正常組、中藥治療中劑量組、西藥治療組之間大鼠血漿食欲素A水平無顯著性差異(P＞0.05)，西藥治療組分別和中藥治療中劑量組、中藥治療高劑量組相比大鼠血漿食欲素A水平均無顯著性差異(P＞0.05)，其他各組間大鼠血漿食欲素A水平均有顯著性差異(P＜0.05)，從均數(shù)看刺激激怒對照組(691.67±32.05pg/ml)和中藥治療低劑量組(648.63±32.48pg/ml)大鼠血

13、漿食欲素A水平明顯高于其他四組，中藥治療中劑量組(571.59±18.75pg/ml)、中藥治療高劑量組(552.09±19.53pg/ml)、西藥治療組(567.19±10.61pg/ml)大鼠血漿食欲素A水平接近于正常組(570.14±24.05pg/ml)水平。
　　 6下丘腦食欲素A水平（表5）：各組大鼠下丘腦食欲素A水平對比有顯著性差異(P＜0.001)。兩兩比較結(jié)果顯示正常組(A)和中藥治療中劑量組(D)、中藥治療高

14、劑量組(E)、西藥治療組(F)之間大鼠下丘腦食欲素A水平無顯著性差異(P＞0.05)，刺激激怒對照組(B)和中藥治療低劑量組(C)之間大鼠下丘腦食欲素A水平無顯著性差異(P＞0.05)，D組、E組、F組各組之間相比大鼠下丘腦食欲素A水平無顯著性差異(P＞0.05)，其他各組間大鼠下丘腦食欲素A水平均有顯著性差異(P＜0.05)，從均數(shù)看B組(3.65±0.76pg/μg)略低與C組(3.99±0.83pg/μg)大鼠下丘腦食欲素A水平，

15、B組、C組明顯低于其他四組大鼠下丘腦食欲素A水平，D組(5.25±0.64pg/μg)、E組(5.49±0.62pg/μg)、F組(5.43±0.35pg/μg)大鼠下丘腦食欲素A水平接近于正常組(5.08±0.45pg/μg)。
　　 7血清瘦素水平與血漿食欲素A水平的相關(guān)性（圖2）：大鼠血清瘦素水平(x)與血漿食欲素A水平(y)呈顯著正相關(guān)關(guān)系，直線回歸方程為y=433.234+13.5240x(r=0.6342,p＜0.0

16、1)。
　　 8血清瘦素水平與下丘腦食欲素A水平的相關(guān)性（圖3）：大鼠血清瘦素水平(x)與下丘腦食欲素A水平(y)呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，直線回歸方程為y=7.4652+0.2145x(r=-0.6030,p＜0.01)。
　　 9血漿食欲素A水平與下丘腦食欲素A水平的相關(guān)性（圖4）：大鼠血漿食欲素A水平(x)與下丘腦食欲素A水平(y)呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，直線回歸方程為y=11.5789+0.0113x(r=-0.6754,p＜

17、0.01)。
　　 結(jié)論：1通過化濁疏肝的方法可以明顯提高FD大鼠的食量和體重，其營養(yǎng)狀況相比非治療狀態(tài)下大鼠恢復(fù)速度明顯加快。
　　 2以化濁疏肝法為指導(dǎo)，采用柴胡疏肝散治療FD可提高大鼠胃動力，但在提高胃動力效應(yīng)方面比嗎丁啉略差。
　　 3采用化濁疏肝法治療FD可使的大鼠血清瘦素和血漿食欲素A分泌水平明顯降低，下丘腦食欲素A分泌水平明顯升高，并隨著藥量的加大這種差異越明顯，這可能是化濁疏肝法治療FD的作用機制