一次力竭性離心運動及恢復期間大鼠骨骼肌超微結構及機械生長因子(MGF)的變化.pdf

1、目的:
　　 研究一次力竭性離心運動及恢復期間大鼠骨骼肌超微結構以及機械生長因子MGF的變化情況。
　　 方法:
　　 實驗一:本研究以24只7周左右的健康雄性SD大鼠為研究對象，并隨機分為安靜對照組(Control);力竭運動即刻組(E0);力竭運動后24h組(E24);力竭運動后48h組(E48)共四組，每組各6只。各力竭運動組進行一次性力竭（下坡跑）運動，在力竭運動后的不同時間點宰殺取樣。所有大鼠用烏拉坦腹

2、腔麻醉、宰殺后迅速取股外側肌、股直肌各一分為二。其中一部分用2.5％戊二醛固定，用于制作電鏡超薄切片，在透射電子顯微鏡下觀察骨骼肌超微結構的變化情況，另一部分保存于液氮中冷凍，用于檢測大鼠股外側肌中機械生長因子MGF的情況。
　　 實驗二:選用4只7周齡成年大鼠和1只新生大鼠，其中成年鼠分組為:安靜對照組1只，鈍挫傷即刻組1只，鈍挫傷24h組1只，鈍挫傷48h組1只。采用急性鈍挫傷模型，分別于鈍挫傷后不同時間點宰殺，迅速取股外側

3、肌并進行即刻培養(yǎng)。采用倒置相差顯微鏡隨時跟拍每天衛(wèi)星細胞培養(yǎng)情況。
　　 結果:
　　 (1)成年大鼠經過一次性力竭離心運動之后，電鏡下觀察其股直肌的超微結構發(fā)現，安靜對照組大鼠骨骼肌的超微結構正常。在一次性力竭運動后即刻E0組出現了炎性細胞，間質血管的改變，而力竭運動24小時后即E24組可見骨骼肌細胞、線粒體和內質網均出現扭曲、腫脹等形態(tài)改變，Z線、M線明顯異常，嵴紊亂等組織學變化情況。
　　 (2)本研究采用

4、酶聯(lián)免疫吸附法即ELISA檢測大鼠血清和骨骼肌中MGF的結果顯示，一方面，從血清中MGF的變化情況來看，力竭運動組E0、E24、E48與安靜對照組相比呈升高趨勢，具有非常顯著性差異(P＜0.01)。另一方面，從骨骼肌中的MGF的變化來看，E0、E24、E48與安靜對照組相比，都有升高趨勢，其中E24組與安靜對照組相比具有非常顯著性的差異(P＜0.01)。
　　 (3)在安靜對照組中發(fā)現骨骼肌衛(wèi)星細胞最初呈圓形，多懸浮于培養(yǎng)液中，

5、1天后細胞逐漸貼壁生長，細胞較小，分布均勻，多呈圓形，此后細胞體積逐漸長大，開始分裂，鏡下可以看見3-5個或多個細胞成串排列。新生鼠的肌衛(wèi)星細胞的培養(yǎng)中，與成年大鼠比較，肌衛(wèi)星細胞的數目較多。肌衛(wèi)星細胞貼壁培養(yǎng)48小時后開始增殖，肌肉衛(wèi)星細胞在第5-8天增殖較快，之后增殖減慢。
　　 結論:
　　 (1)一次性力竭運動后大鼠骨骼肌超微結構出現顯著性的組織學變化，例如肌原纖維排列混亂，結構破壞，M線、Z線不夠清晰，甚至相鄰

6、間斷裂， H帶、 I帶界限模糊，細胞內質網線粒體均發(fā)生形變，細胞間質水腫明顯等現象。
　　 (2)一次性力竭運動及恢復期間，與安靜對照組相比，大鼠血清和骨骼肌中機械生長因子(MGF)在力竭后即刻，24小時和48小時呈現增高的趨勢，且在24小時后達到峰值，提示MGF可能加快骨骼肌組織和血管再生修復。
　　 (3)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞體外培養(yǎng)需要較高的條件要求，鈍挫傷后骨骼肌衛(wèi)星細胞的增殖能力比安靜對照組的增殖能力要強。并且新