缺血性腦卒中不同亞型患者血漿miRNAs表達(dá)譜變化分析.pdf

1、目的：
　　研究缺血性腦卒中不同亞型患者血漿中miRNAs（microRNA）表達(dá)譜的差異。
　　方法：
　　1.選取2012年11—12月于青島大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科就診的首次發(fā)病的16例患者，按TOAST分型將其分為大動(dòng)脈粥樣硬化性（large artery atherosclerotic，LAA）卒中組8例，小動(dòng)脈閉塞性（small artery occlusion，SAO）卒中組8例，以及同期健康體檢者8名作為對(duì)

2、照組，應(yīng)用高通量測(cè)序法檢測(cè)各組血漿中miRNAs的表達(dá)譜，篩選出差異表達(dá)的miRNAs。
　　2.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法對(duì)其中的miR-146b-5p、miR-23a-3p、miR-451a進(jìn)行驗(yàn)證。
　　3.對(duì)篩選出的差異表達(dá)的miRNAs進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)及生物信息學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1. LAA組、SAO組及對(duì)照組血漿中分別檢測(cè)到369個(gè)miRNAs成熟體。通過(guò)miRNAs差異分析，發(fā)現(xiàn)let-7a-5

3、p、miR-744-5p等12個(gè)miRNAs在3組中均呈現(xiàn)差異性表達(dá)（表達(dá)差異均大于2倍，P＜0.01）；與對(duì)照組比較，miR-126-5p、miR-23a-3p、miR-143-3p等34個(gè)miRNAs在LAA組表達(dá)顯著下調(diào)（表達(dá)差異均大于2倍，P＜0.01）；在SAO組中miR-1304-3p、miR-451a較對(duì)照組表達(dá)顯著下調(diào)（表達(dá)差異均大于2倍，P＜0.01），而miR-320a、miR-320b、miR-99b-5p等27個(gè)

4、miRNAs較對(duì)照組表達(dá)則顯著上調(diào)（表達(dá)差異均大于2倍，P＜0.01）。
　　2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)其中的miR-146b-5p、miR-23a-3p、miR-451a的驗(yàn)證結(jié)果與高通量檢測(cè)結(jié)果一致。
　　3.生物信息學(xué)分析表明，差異表達(dá)的miRNAs調(diào)控的靶基因主要與細(xì)胞增殖、黏附、代謝等生物學(xué)功能相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　LAA型卒中患者及SAO型卒中患者血漿miRNAs表達(dá)譜存在明顯差異，提示miRNAs可