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文檔簡介
1、高效毛細管電泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresisHPCE)是20世紀80年代初發(fā)展起來的一種新型分離分析技術(shù)。與高效液相色譜技術(shù)相比,毛細管電泳(CapillaryElectrophoresisCE)具有分離效率高、靈敏度高、速度快、所需樣品少、成本低等特點。CE的理論和應用研究是分析化學最活躍的領域之一。然而,由于CE進樣體積很小以及在柱檢測的光程較短,通用型紫外檢測器雖然能達到較低的質(zhì)量
2、檢測限,但濃度檢測限仍比較高,這使得CE在分離測定實際樣品中的痕量組分時受到很大的限制。迄今為止,如何提高CE的檢測靈敏度仍然是分析工作者關(guān)注的主要問題之一。
目的:采用毛細管大體積樣品堆積法建立測定款冬花中的蘆丁,綠原酸的方法;聯(lián)用反向陰離子選擇性耗盡進樣和膠束掃集兩種在線富集技術(shù),建立反向膠束毛細管電泳法測定款冬花中槲皮素的方法;采用反向毛細管電泳法測定遠志中的細葉遠志皂苷元。
方法:毛細管大體積樣品堆積
3、法電泳條件:以40mmol/LNaH2PO4-40mmol/LBorax-30%methanol(pH9.0)為緩沖體系,運行電壓為20kv(+)—(-),壓力進樣5psi×4s,進水時間40s,測量波長364nm;陰離子膠束掃集毛細管電泳法電泳條件:50mmol/LNaH2PO4-25mmol/LH3BO3(pH=2)-20%甲醇-20%SDS為緩沖體系,分離電壓20kv,進樣電壓20kv,進樣時間30s,進水時間40s,測量波長36
4、4nm;反向毛細管電泳法電泳條件:50mmol/L硼砂-35%甲醇為緩沖體系,測量波長214nm。
結(jié)果:在優(yōu)化的實驗條件下,用大體積樣品堆積法測定款冬花中蘆丁,金絲桃苷,綠原酸的含量,線性范圍分別為20~400μg/mL,16.5~330μg/mL,25~500μg/mL,平均回收率分別為100.3%、100.O%和100.5%;陰離子膠束掃集毛細管電動色譜法測定款冬花中槲皮素的含量,槲皮素和鄰峰能達到良好分離,在10~
5、160μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為109.7%。反向毛細管電泳法測定遠志中細葉遠志皂苷元的含量,分別在56.3~900μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率分別為102.4%。
結(jié)論:本文采用毛細管電泳大體積樣品電堆積富集方法對款冬花中三種化合物進行了分析,實現(xiàn)了大體積進樣;采用反向陰離子耗盡進樣-膠束掃集毛細管電動色譜法在線富集技術(shù),建立了反向膠束毛細管電泳方法測定款冬花中槲皮素的方法;為該藥材的質(zhì)量研究
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