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文檔簡介
1、背景與目的:
幽門螺桿菌(H.pylori)的感染和多種胃腸道疾病的發(fā)生密切相關,有效根除H.pylori對防治H.pylori相關性疾病極為重要。目前H.pylori的根除治療有質子泵抑制加2種抗生素的三聯(lián)方案和質子泵抑制加鉍劑再加2種抗生素的四聯(lián)方案,由于H.pylori對抗生素的耐藥,這些方案的H.pylori根除率仍不盡人意。為了提高H.pylori的根除率,人們通過延長療程,增加抗生素劑量,抗菌藥物種類由2種增加到3
2、種(如序貫方案、伴同方案、雜合方案)。那么,隨著H.pylori對抗生素的耐藥率的逐年增高,這些方案對H.pylori的根除率是否與三聯(lián)方案一樣逐漸下降到不可接受的水平。因此,人們試圖從非抗生素途徑尋找治療H.pylori感染的方法,以克服H.pylori對抗生素耐藥的影響,提高H.pylori根除率,中藥就是其中一種。作為天然中藥的草珊瑚具有抗炎和廣譜抗菌作用,其是否有抗H.pylori作用,目前未見報道。為此,本文采用瓊脂稀釋法研究
3、了草珊瑚浸膏(sarcandra glabra extract,SGE)對H.pylori的抑菌作用,同時觀察了它與我國第四次幽門螺桿菌感染診治共識推薦的6種抗生素是否具有協(xié)同作用,尤其是可否降低對H.pylori耐藥抗生素的最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC),從而克服H.pylori對抗生素的耐藥。此外,還觀察了SGE作用H.pylori后細菌內容物的外滲,以探索SGE抗H.pyl
4、ori作用的增加H.pylori對抗生素敏感性的可能機制,為SGE用于H.pylori相關性疾病的治療提供依據(jù)。
方法:
1、H.pylori菌株:從南昌大學第一附屬醫(yī)院消化研究所保存的2010年6月~2013年8月期間已-行濃度梯度法(E-test)或紙片擴散法(Kirby-Bauer,K-B)藥敏感檢測的653例H.pylori菌株中,篩選出對我國第四次共識推薦的6種抗生素(A-阿莫西林,C-克拉霉素,M-甲硝唑
5、,L-左氧氟沙星,T-四環(huán)素和F-呋喃唑酮)中,至少對其中一種耐藥的H. pylori32株,其中對3種及3種以上抗生素耐藥的有8株,對2種抗生素耐藥的有16株,對1種抗生素耐藥的有8株。
2、瓊脂二倍稀釋法驗證上述32株H.pylori的最小抑菌濃度(minimalinhibitory concentration,MIC)。
3、瓊脂二倍稀釋法檢測SGE對上述32株H.pylori的MIC。
4、草珊瑚與
6、6種抗生素的聯(lián)合效應:遵照CLSI細菌藥敏實驗執(zhí)行標準,按照棋盤法設計組合系列不同濃度的兩種抗菌藥物,用瓊脂平板法測定6種抗菌藥物在單用和與SGE聯(lián)用時的MIC。計算部分抑菌濃度指數(shù)(fractional inhibitory concentration index,F(xiàn)ICI)以評估藥物之間的聯(lián)合效應。當FICI≤0.5為協(xié)同作用,0.5
5、SGE
7、對H.pylori外膜屏障功能的影響:分別選取多重耐藥和對6種抗菌藥物均敏感菌株的H.pylori各1株,與95μg/mL的SGE溶液作用24h后取上清液測其中葡萄糖含量及天門冬氨酸氨基轉移酶活性,以判定細菌內容物滲漏情況,每株菌重復2次。
結果:
1、SGE對32株H.pylori的MIC分布在11.9~47.5μg/mL之間。
2、SGE與6種抗生素之間的聯(lián)合效應:①SGE+A:FICI≤0.5(80%
8、),0.5<FICI≤1(20%);②SGE+M:FICI≤0.5(70%),0.5<FICI≤1(30%);③SGE+L:FICI≤0.5(60%),0.5<FICI≤1(40%);④SGE+F:FICI≤0.5(90%),0.5<FICI≤1(10%);⑤SGE+T:FICI≤0.5(90%),0.5<FICI≤1(10%);⑥SGE+C:FICI≤0.5(80%),0.5<FICI≤1(20%)。
3、無論是對抗菌藥物耐
9、藥株還是敏感株,95μg/mL的SGE與其作用24h后,上清液中AST和Glu含量與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P<0.01),SGE組的AST和GLU含量顯著高于對照組。表明SGE可破壞H.pylori的外膜屏障功能。
結論:
1、SGE體外對耐藥H.pylori菌株有明顯的抑制效果。
2、SGE與6種抗生素聯(lián)合對耐藥H.pylori菌株的體外聯(lián)合效應表現(xiàn)為協(xié)同和相加作用,且以協(xié)同作用為主。
3、S
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