對幽門螺桿菌具有拮抗作用的乳桿菌的篩選及其生物學(xué)特性.pdf

1、以健康嬰兒糞便及光明乳業(yè)技術(shù)中心保藏菌種為篩選源，利用瓊脂塊擴(kuò)散法和孔擴(kuò)散法篩選得到5株對Hp具有較強(qiáng)抑制作用的乳酸菌，其中J16和庫存益生菌株LactobacilluscaseiLC2W的抑菌效果較為明顯。 對J16進(jìn)行了菌種鑒定和生長特性研究。采用傳統(tǒng)方法和16SRNA片段分析的方法，確定J16為Bifidobacteriumlongum，其最適培養(yǎng)溫度約為37℃；最適生長pH值為6-7；最適接種量為8％；在MRS-brot

2、h中4h進(jìn)入對數(shù)生長期，14h左右進(jìn)入穩(wěn)定期；J16發(fā)酵乳4℃保藏活菌半衰期約為11天；在人工胃液中表現(xiàn)出較好的耐受性；藥敏實(shí)驗(yàn)表明，J16對24種常用抗生素中16種敏感。 初步探討了Bifidobacteriumlongum.J16和L.easeiLC2W兩株菌對HpSS1的抑菌機(jī)理。J16和LC2W的菌體均不具有抑菌能力；二者發(fā)酵MRS的上清液對Hp有較強(qiáng)抑制作用，但并非有機(jī)酸和H2O2所致；J16的抑菌成分粗提物對胃蛋白酶

3、、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、熱處理不敏感，但經(jīng)蛋白酶K作用后抑菌作用增強(qiáng)；LC2W的抑菌成分粗提物則對上述處理均不敏感；在酸性pH值范圍內(nèi)(pH1.5-4.0)，J16和LC2W發(fā)酵乳對Hp的抑菌作用不消失。 采用4周齡C57BL/6小鼠感染模型檢驗(yàn)了J16和LC2W在體內(nèi)對Hp的預(yù)防和治療作用。經(jīng)過尿素酶反應(yīng)、Hp菌體培養(yǎng)及病理組織切片檢驗(yàn)，結(jié)果表明，J16發(fā)酵乳具有預(yù)防Hp感染的功效；灌胃J16發(fā)酵乳(治療Ⅰ組)和LC2W菌體懸