泡菜中產(chǎn)細菌素植物乳桿菌的篩選及其所產(chǎn)細菌素生物學(xué)特性的研究.pdf

1、細菌素是由某些細菌產(chǎn)生的一類可以殺滅或抑制其它微生物的蛋白類物質(zhì)。本項研究旨在從泡菜中篩選得到具有天然食品防腐劑前景的產(chǎn)細菌素植物乳桿菌。
　　 從發(fā)酵2周后的泡菜中共篩選得到乳酸菌119株，其中球菌53株，桿菌66株，對所有菌株進行兩兩相交拮抗，選定乳桿菌C6為指示菌菌株，乳桿菌C8、C10、C18和C25為待定的產(chǎn)細菌素菌株。對4株待定產(chǎn)細菌素菌株進行紫外誘變處理,并對誘變株進行有機酸排除、過氧化氫排除以及鹽析產(chǎn)物抑菌試驗表

2、明，突變菌株C8-1為產(chǎn)細菌素菌株?；诩毎螒B(tài)學(xué)、生理生化及16S rDNA測序數(shù)據(jù)，菌株C8-1與C6被鑒定為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum），菌株C8-1與植物乳桿菌WCFS1的同源性達99％。
　　 對植物乳桿菌C8-1發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果表明，產(chǎn)細菌素的適宜培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)基pH為6.5，培養(yǎng)時間為28h；蔗糖為最佳碳源，大豆蛋白胨為最佳氮源，兩者的最適添加量分別為2％和1.5％；培養(yǎng)基中

3、牛肉膏與Tween80的最適添加量分別為1.5％和3‰。當(dāng)以檸檬酸三銨為唯一氮源時，菌株C8-1不能合成細菌素。發(fā)酵條件優(yōu)化后，植物乳桿菌C8-1所產(chǎn)細菌素的效價達到278.24 IU/mL，是優(yōu)化前的10.7倍。
　　 對植物乳桿菌C8-1的發(fā)酵上清液按70％硫酸銨飽和度鹽析或40％～70％硫酸銨飽和度的分段鹽析,鹽析產(chǎn)物分別經(jīng)透析、蔗糖濃縮后同時進行Tricine-SDS-PAGE檢測，確定該細菌素分子量約為16,500Da

4、。
　　 植物乳桿菌C8-1所產(chǎn)細菌素具有較寬的抑菌譜，不僅能夠抑制革蘭氏陽性的金黃色葡萄球菌和試驗采用的大部分乳酸菌菌株，而且對大腸桿菌、假單胞菌、鞘氨醇桿菌、黃桿菌等革蘭氏陰性菌也具有極強的抑制效果。該細菌素溫度穩(wěn)定性高,4℃冷藏5d、-20℃冷凍5d以及60℃、80℃、100℃和121℃分別加熱15min,活性損失均不超過6％。該細菌素活性隨pH增大逐步降低，當(dāng)pH≥6時不顯示抑菌活性。用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶處理