產(chǎn)細(xì)菌素蠟樣芽孢桿菌的篩選、鑒定及培養(yǎng)基優(yōu)化.pdf

1、由于食品工業(yè)中廣泛使用的化學(xué)防腐劑引起的安全問(wèn)題越來(lái)越多,人們開始尋找安全高效的新型防腐劑。細(xì)菌素是一類由細(xì)菌產(chǎn)生的抑菌物質(zhì),具有高效、無(wú)毒副作用、無(wú)殘留、無(wú)抗藥性等優(yōu)點(diǎn),是近年來(lái)食品生物防腐劑研究的重點(diǎn)之一,同時(shí)也被認(rèn)為是抗生素的最佳替代物。因此,本文主要的目的在于篩選出產(chǎn)細(xì)菌素的菌株,并對(duì)篩選出來(lái)的目的菌株的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,從而提高目的菌株產(chǎn)細(xì)菌素的量。
　　本文以金黃色葡萄球菌為指示菌,從土壤中分離篩選得到目的

2、菌株,命名為XH25。在排除有機(jī)酸與過(guò)氧化氫實(shí)驗(yàn)以及蛋白酶K敏感試驗(yàn)后綜合推測(cè)出菌株XH25的抑菌效果可能來(lái)源于細(xì)菌素。篩選得到的XH25菌株的各項(xiàng)生理生化測(cè)定結(jié)果顯示:革蘭氏染色試驗(yàn)、過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)、淀粉水解試驗(yàn)、硝酸還原試驗(yàn)、酯酶試驗(yàn)、M.R試驗(yàn)、V.P試驗(yàn)、卵磷脂酶水解試驗(yàn)、酪素水解試驗(yàn)和糖醇類發(fā)酵試驗(yàn)都呈陽(yáng)性,H2S試驗(yàn)呈陰性;再結(jié)合菌株XH25的16S rRNA分子鑒定通過(guò)序列比對(duì)分析、系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建,鑒定出菌株XH25為蠟

3、樣芽孢桿菌。
　　采用 Plackett-Burman(簡(jiǎn)稱 PB)試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法(Response surface methodology,簡(jiǎn)稱RSM)對(duì)菌株XH25的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化。先用Plackett-Burman試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出對(duì)細(xì)菌素產(chǎn)生有顯著影響的因素,確定影響細(xì)菌素產(chǎn)生的主要成分;然后通過(guò)最陡爬坡試驗(yàn)找出RSM設(shè)計(jì)的中心點(diǎn);最后利用RSM分析法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化。優(yōu)化結(jié)果表明,培養(yǎng)基的最優(yōu)組合為:可溶性淀粉1