產(chǎn)細(xì)菌素植物乳桿菌的初探及其應(yīng)用.pdf

1、乳酸菌新資源及特性的研究一直倍受關(guān)注。乳酸菌產(chǎn)生的乳酸菌素也早在1928年被很多研究學(xué)者所認(rèn)知，并不斷廣泛深入地研究。由于乳酸菌素具有高效、無毒、無殘留、無抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，在很多應(yīng)用領(lǐng)域是人工合成的防腐劑及抗生素最佳的替代物。
　　 本研究通過分離純化一株植物乳桿菌ZJ317所產(chǎn)乳酸菌素，優(yōu)化發(fā)酵條件提高乳酸菌素的產(chǎn)量，并考察該菌作為飼料添加劑的應(yīng)用效果，以期代替飼料抗生素。
　　 本研究的主要內(nèi)容分為三部分：
　　

2、 1)比較三種粗提方法，即吸附法、硫酸銨鹽析、雙水相萃取法，對分離植物乳桿菌ZJ317抑菌活性物質(zhì)的效果，結(jié)果顯示，PEG/(NH4)2SO4雙水相體系的萃取效果最好，萃取條件為：17.971％的PEG2000，18.430％的硫酸銨，1％的NaCl，pH為3.766;隨后采用流動相為蒸餾水，流速為1mL/min的SephacrylS-100HR凝膠過濾層析法，除去PEG等物質(zhì)；經(jīng)各種離子層析法篩選，選定DEAESepharoseFa

3、stFlow層析柱，純化條件為：流速1mL/min，平衡液為pH為5.4，20mM的乙酸-乙酸鈉緩沖液，洗脫液為含1MNaCl的平衡液；再經(jīng)Tricine-SDS-PAGE電泳法檢測該抑菌活性物質(zhì)的分子量為4.0kDa左右，屬于小分子多肽類物質(zhì)，證實(shí)植物乳桿菌ZJ317產(chǎn)的抑菌活性物質(zhì)為乳酸菌素，命名為植物乳桿菌素ZJ317。
　　 2)通過單因素實(shí)驗(yàn)、PB實(shí)驗(yàn)、最陡爬坡試驗(yàn)及響應(yīng)面法優(yōu)化的最佳發(fā)酵條件為：培養(yǎng)溫度為37℃，裝液

4、量為20mL/50mL，培養(yǎng)基初始pH值為6.5，接種量為5.00％;2.15％葡萄糖、1.50％麥芽糖、0.50％蛋白胨、1.60％酵母提取物、0.20％磷酸二氫鉀、0.50％乙酸鈉、0.20％檸橡酸三銨、0.02％七水硫酸鎂、0.005％四水硫酸錳，0.20％吐溫80，產(chǎn)植物乳桿菌素ZJ317的效價(jià)較優(yōu)化前提高了60.22％。
　　 3)初步研究植物乳桿菌素ZJ317及其生產(chǎn)菌共同作為飼料添加劑應(yīng)用于剛斷奶的仔豬。其對生產(chǎn)性